❶ thinkpad t系列怎麼樣
肯定是很不錯的。thinkpad本身就是超一線的品牌了，質量做工散熱全是有保證的。
並且t系列是thinkpad各個系列中很高檔的一個系列，更有保證了。最高檔的系列就是t x這兩個系列的了。
❷ 為什麼g418磷酸化後就沒有毒性了
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這是我搜索的,貼上看看是否有幫助!
原理
分析轉化的功能和表達需要DNA穩定轉染至宿主細胞染色體。外源基因進入細胞後，部分能夠通過細胞質進入細胞核內，根據細胞類型，至多80％的進入核內的外源DNA得到瞬時表達。極少數情況下，進入細胞的外源DNA通過系列非同源性分子間重組核連接，形成巨大的***結構最終整合進細胞染色體。細胞基因組自由部分表達，所以整合並不一定意味著表達，只有整合到表達區的基因才會表達，而且整合到不同的染色體區段的外源基因的表達的量也是不同的。由於攝取、整合、表達外源基因是小概率事件，通常根據新表型篩選穩定轉染體。一般情況下這種新表型由共轉染的編碼抗生素抗性基因提供。細菌Tn5轉座子序列（neo抗性基因）攜帶的氨基糖苷磷酸轉移酶可以將G418轉變成無毒形式。G418是一種氨基糖類抗生素，其結構與新黴素、慶大黴素、卡那黴素相似，它通過影響80S核糖體功能而阻斷蛋白質合成,對原核和真核等細胞都有毒性 ,包括細菌、酵母、植物和哺乳動物細胞 ,也包括原生動物和蠕蟲。是穩定轉染最常用的選擇試劑。當neo基因被整合進真核細胞基因組合適的地方後 ,則能啟動neo基因編碼的序列轉錄為mRNA,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的高效表達 ,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方面得以廣泛應用。
在進行轉染時細胞膜受到影響，抗生素可能對細胞產生較大影響，加上G418有殺菌作用，所以有人主張轉讓時不加其它抗生素。其實G418本身有很好的殺菌效果，在用G418進行篩選的過程中很少會發生污染。但有一點，其實我覺得問題也不是很大，那就是：在老外的一本實驗手冊中提到，在脂質體轉染時所用培養基中最好不加任何抗生素。我想他的想法可能是脂質體對細胞膜有影響，可能此時加抗生素對細胞損傷較大。因為慶大黴素、鏈黴素、G418均是氨基糖甙類葯物，其葯理作用完全一樣。所以沒有必要再用，而且由於另外抗生素的添加實際增加氨基糖甙類葯物的濃度，劑量有誤差，不利於各實驗室之間的交流，在實際操作中，培養液中有抗生素對細胞培養與篩選影響不大。
有人認為用磷酸鈣共沉澱轉染法篩選穩定整合子較好，但這種觀點是很多年以前的觀點了，而且只是少數人的觀點。我兩種方法都用過，但沒有特異的比較過，感覺都可以。磷酸鈣便宜，但對溶液配置和實驗操作要求很高，尤其是溶液的PH值，要求精確到小數點後2位。脂質體是現在主流的轉染試劑，從沒有人說這種方法做整合穩定表達不行。非脂質體是這幾年發展很快的技術，轉染效率低，細胞毒性小，價格也不貴，Qiagen就有一個系列。我個人覺得不必要花太多時間在這方面，自己實驗室用得好的技術可以堅持，沒有經驗的可以選擇一個較著名的公司的產品開始，購買之前先下載個說明書看看。有精力就比較一下幾種方法，一般的用達到目的就行了。關鍵是實驗設計。
G418和篩選
篩選之前
由於每種細胞對G418的敏感性不同，而且不同的廠家生產的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定G418的最佳篩選濃度。具體如下：將細胞稀釋到1000個細胞/mL，在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內進行篩選，選擇出在10~14天內使細胞全部死亡的最低G418濃度來進行下一步的篩選試驗。
由於每種細胞對G418的敏感性不同，一般變動在100ug/ml～1000ug/ml范圍。而且不同的廠家生產的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定你的細胞對這一批G418的最佳篩選濃度。盡管如此，特性明確的細胞系G418的最佳用量還是穩定的。《分子克隆》給出了幾個常用細胞系所需G418的最佳用量。
細胞系或機體 G418濃度（ug/ml）
中國倉鼠卵巢細胞 700～800
Madin-Darby犬腎細胞 500
人上皮A431細胞 400
猿CV-1細胞 500
盤基網柄菌屬 10～35
植物 10
酵母
125～500
看下面的一個試驗：3×106個細胞電轉後，分別接種1/4000，1/1000，1/300細胞到24孔板中，48 h後加葯篩選，此時1/300細胞孔內大約50%匯合度。理論上1/4000孔內應有4%的匯合度。篩選9天後，觀察1/4000孔內有兩三個克隆，按比例1/300孔內應該有幾十個克隆，事實上，它們幾乎全死光了，只有幾個克隆。所以匯合度對G418篩選結果的影響很大，一般篩選時匯合度不宜超過50%！
加葯時間
由於基因轉染到細胞內之後要一段時間才能表達出蛋白質。所以篩選不能太早；但是也不能太晚，因為轉染了外源基因的細胞代謝負荷較大，增值較慢，時間長了就會被沒有外源基因轉入的細胞所淹沒，最終導致篩選不出陽性克隆，一般要在轉染24小時之後才開始加G418篩選。隨著細胞的代謝G418的濃度和活性都回下降，所以每3~5天都要更換一次含有G418的篩選液。這時葯物濃度可以降至200ug/ml。
培養液
加葯篩選約6天左右，細胞會大量死亡，孔中只剩下的細胞寥寥無幾。這時會出現兩個問題：1.死亡的細胞會裂解釋放出有害物質，導致那些有neo表達的陽性細胞死亡，即非選擇性死亡。2.孔中細胞數目很少，細胞之間的信號會變得很弱，也會導致陽性細胞的狀態不佳甚至死亡。這個時候需要一種特殊的培養液：假如你要轉染3T3細胞，在3T3細胞匯合度達到80%的時候，換液，培養過夜之後收集培養液，通過濾器消毒，和新鮮的培養液按1：1混合備用。再轉染後篩選過程中就可以應用這種培養基。
挑選單克隆的優化
為了盡量減少陰性克隆的死亡給陽性克隆造成的不利影響以及增加陽性克隆的得率，可以應用套環法或刮除法結合有限稀釋法來篩選陽性克隆。加葯後，在高倍鏡下，陽性克隆和陰性克隆很容易辨認，在陽性克隆下用記號筆做個標記。然後刮除隱性克隆，消化陽性克隆後繼續篩選培養；或則用套環套住陽性克隆，在套環內加胰蛋白酶或EDTA消化，把消化液吸到另外一個新的孔中培養。最後再用有限稀釋法把陽性克隆在96孔板中篩選。
鑒定之後
一般經過4周左右的篩選，得到的陽性克隆都比較穩定。但是外源基因如果沒有整合到基因組中的話，目的基因還是很容易丟失的。但是外源基因整合到基因組中的概率太小了，而且是隨機整合，會導致表達的目的蛋白的量產生很大差異。隨著培養時間的延續，那些丟失了外源基因的細胞和很少表達目的基因的細胞會占據優勢，強表達目的蛋白的細胞會越來越少。這樣再次篩選是必不可少的。只有經過2次以上的篩選之後才能找到那種我們想要的強分泌目的蛋白的，遺傳穩定的細胞克隆。
Protocal
1.G418的配製： 取1g G418溶於1ml 1M的HEPES液中，加蒸餾水至10ml，過濾消毒，4度保存。
2.細胞培養：取待測培養細胞，制備成細胞懸液，按等量接種入多孔培養板中，培養6小時左右開始加葯。
3.制備篩選培養基：在100ug/ml～1000ug/ml范圍內確定幾個梯度，比如先做個100ug/ml、400ug/ml、800ug/ml、1000ug/ml，按梯度濃度用培養基稀釋G418製成篩選培養基。
4.加G418篩選: 吸除培養孔中培養基，PBS洗滌一次，每孔中加入不同濃度的篩選培養基。
5.換液：根據培養基的顏色和細胞生長情況，每3~5天更換一次篩選培養基。方法同4。
6.確定最佳篩選濃度：在篩選10～14天內能夠殺死所有細胞的最小G418濃度即為最佳篩選濃度。在第一輪就篩選出最佳G418濃度的可能性不大，最有可能的是出現這種情況：用某一濃度G418的量在篩選14天後還不能殺死細胞，而用下一個梯度的 G418的量在10天前就看不到活細胞了。假如是400ug/ml不能殺死細胞，而800ug/ml在第5天就把所有細胞都殺死了，則可以再用500ug/ml、600ug/ml、700ug/ml進一步篩選，以確定最佳篩選濃度！心得：由於特性明確的細胞系G418的最佳用量還是比較穩定的，所以有時候不需要在這么大范圍內進行篩選。比如說你要轉染NIH3T3細胞 ，現在我告訴你我測試過NIH3T3細胞對G418的敏感性，我用的篩選濃度是200 ug/ml。這時你就可以做150ug/ml、200ug/ml、 300ug/ml三個濃度進行篩選。
通過預實驗確定了最佳篩選濃度後，就可以做穩定轉染了。
a 轉染：轉染後培養24小時或者更長，到細胞增長接近匯合時按1：4密度傳代，繼續培養，待細胞密度增至50％～70％匯合時；
b 加G418:去掉培養液，PBS洗一次，加入按最佳篩選濃度配製好的G418篩選培養基。
c 換液：根據培養基的顏色和細胞生長情況，每3~5天更換一次篩選培養基。當有大量細胞死亡時，可以把G418濃度減半維持篩選。 篩選10～14天後，可見有抗性的克隆出現，停葯培養，待其逐漸增大後；
d 挑單克隆：制備細胞懸液，細胞計數，用培養基稀釋細胞到1個/10ul。在96孔板中加入培養基150ul/孔，再加入細胞懸液10ul/孔。待其逐漸增大後轉入到48孔中增殖。
e 單克隆鑒定：細胞大量擴增後，提取總RNA，做RT-PCR檢測目的基因是否存在。
常見問題：
1.轉進去的重組質粒以什麼形式存在於細胞內的？
無怪乎兩種形式：整合在染色體中和存在於細胞質中。沒有經過篩選前大部分轉染進細胞的質粒是存在於胞質中的，但是這種質粒是不穩定的，基本上篩選不出這種單克隆，只有穩定整合入染色體的才是我們想要的穩定細胞系。
2.neo基因和目的基因是不是一定會整合在一起？
整合是隨機發生的非同源性重組，neo基因表達而目的基因不一定都表達，所以在篩選之後還要用RT-PCR的方法進一步鑒定。
培養基處理的個人技巧
體內的任何細胞被置於體外培養後，對環境都有一個適應過程，期間細胞對培養液具有同化作用，即細胞從培養液中攝取營養的同時，也向培養液排出自己的代謝產物和其它一些物質，其中有排泄物也有促細胞生長因子。這個過程也是細胞同化培養基的過程。細胞越多則其同化作用越強，所以細胞數目多比數目少較易生長。在篩選後期，大批細胞死亡，不換液沒有死亡的細胞就會受到死亡細胞的影響，換液後殘留的少量細胞對培養基的同化作用不強，也不利於生長。我是用適應性培養基來解決這一問題的：
適應性培養基的配製
a 培養同源細胞至半匯合狀態時，更換一次培養液，再繼續培養24～48小時後，吸出所有培養液
b 離心：3000～4000rpm 10 min後，吸取上清液
c 慮過：再經直徑0.22um濾器過濾，再加入2倍體積的新鮮培養基，低溫凍存備用。
eeflying
1. G418篩選要做預試驗確定最佳濃度，將細胞稀釋至1000cell/mL，每孔100uL加入有培養基的24孔板，將每孔中的G418濃度稀釋至0，100，200，300，400，500，600，700，800，900，1000，1100ng/mL等12個級別。培養10-14天，以最低細胞全部死亡濃度為基準，一般400-800左右，篩選時比該濃度再高一個級別，維持使用篩選濃度的一半。
2. 我們掌握是傳過10代以後用維持量，但不能不用，因為有時候抗性基因會丟失，如果沒有G418，很快會形成優勢的。
3. 即是有G418抗性，也不一定有目的基因，單克隆化操作是很重要的。
轉染後，每個細胞內目的基因與宿主染色體的整合狀況是不同的，目的蛋白表達有的多，有的少，外源蛋白表達少的細胞由於代謝負荷較小，所以生長較快，在生長若干代之後，表達少的細胞會形成優勢，長期之後，表達最弱的細胞會由於競爭優勢佔主要，轉綠色熒光蛋白基因後，表達越來越暗就是這個道理。所以，要進行單克隆化操作，使得到的均來自於同一祖先細胞，遺傳性狀盡量一致，也是對高表達細胞的保護。
操作用96孔板法，每代細胞長滿後，大多數凍存，留200cell左右就可以進行該操作了， 該方法在很多關於單克隆抗體和細胞原代培養書中均有講述。
1. 可以肯定的是，外源基因與宿主染色體之間的整合是隨機的而且不是單拷貝的，這點我們做過FISH驗證過，表達量與整合數目，上游序列特性，特定部位DNA立體結構都是相關的，裝入了SV40隻是增加了表達了數目，但並不能掩蓋其它因素對表達的影響。按你的講法，轉染完GFP的細胞應該亮度一致，但實際上差別很大。neo基因也是這樣，而且，同一細胞中不同基因的拷貝數不會相同，不同細胞同一基因的數目也不會相同，這點可以用數學關於泊松分布的觀點理解。有時，neo表達了，但目的基因丟失了的情況也是有的。
2. 那為什麼還要篩選基因？是這樣，用概率論的思維來理解，某一細胞內隨機含有一定數目拷貝數外源基因基因，那麼，一種基因拷貝數為0的可能性，及所有拷貝均為另一種基因的概率就很小，很大的概率為外源基因的不均質。打個比方，一個大口袋，抓100個紅球，再抓100個黃球，然後以從中抓若干個，這些球均為紅球的概率有多大呢？應該是很小的。紅球就是neo，黃球就是你的目的基因。我們用neo，實際上是篩選的外源基因整合的數目，怎麼說呢？用剛才的例子來說，如果我們抓著5個紅球，另一次抓著10個紅球，可以肯定，第二次抓的球比較多，那麼第二次黃球數目比第一次多的概率就很大了。因為二者出現的概率比是恆定的。
3. 維持就是只要養這種細胞，就要維持。可以再低些，但不能沒有。或者隔一定時間從新使用篩選量壓一下，我不知你是否干臨床，想想抗生素的用葯原則，反向思維一下，實際上我們在篩選耐葯株呀。
4. neo的產物是酶，過高的G418濃度就要有更多的neo酶來支持，否則細胞也要被毒死的，而此時過多的酶要求會對細胞代謝造成太大負擔，細胞可能因此無法完成分裂與增殖，我們曾試過，即使在同一轉染陽性細胞，在不同濃度的G418液中生長速度也不同，嚴重形態也不同。這就是酶與底物的比例關系嘛，這回不用數論的，用米氏方程理解吧。
5. 胰酶的作用不必理會，有的細胞受影響，還有的細胞不受影響，由幾代之後，不受影響的細胞會占優勢的。
僅是我從臨床抗生素和化療葯的使用原則中悟出的道理，實在是個人經驗，而且在基礎科學領域頂多算票友，我還是想聽聽諸位專業人士的理解和經驗。
在第10天左右就手挑單克隆或者96孔板單克隆操作了
本帖開始我就講了如何確定基準濃度，篩選濃度是基準濃度的高一級，維持用篩選濃度的一半。
Feynman_R
匯合度(confluence)也許是我們實驗室的翻譯，實際上就是指細胞占培養表面的比例，如果細胞鋪滿了整個容器，我們就認為它們100%匯合，也就是匯合度100%。
最近的一個實驗是：3×106細胞電轉後，我把電激杯中的細胞分別接種1/4000和1/1000和1/300到24孔板中，48小時後加g418篩選，這個時候接種了1/300細胞的孔會大約50%匯合，而理論上接種了1/4000細胞的孔會4%左右匯合，今天是篩選後第9天，觀察到1/4000孔有兩三個小克隆，按道理1/300孔會有20-30個克隆，但實際的情況是它們幾乎全部死光了，僅有少數存活細胞！
所以我認為匯合度對g418篩選影響很大，這耽誤了我將一個多月。
jiangql 同意菊花與刀對你的建議。我的感覺G418篩選時間太長，到後來一般會對細胞生長有影響。以下是一些建議，供參考：
首先需要擴增細胞，凍存部分中間產物細胞後，再做克隆化比較合適，否則一旦污染就會全軍覆沒。
一般5～7天後G418就可以減半維持。
勤換液，去除死細胞，可以減少對存活細胞的影響。
血清濃度可以高到20％，質量要好。
在此輸入您的回答，每一次專業解答都將打造您的權威形象
❸ 想升級我的電腦，希望可以能流暢做平面圖，cad，ps之類的軟體請問怎麼配置。盡量保持能用的硬體！
架構太舊，如果是用作專業應用的，想單升級某幾樣配件以達到流暢處理效果是不可能的。因為現在是整體架構升級，換一樣新型號的配件，其它配件基本通通都要換掉，不象以前，可以換一二樣配件就可以達到不錯的性能提升。你現在想在原有的基礎上更換配件，也只能換舊式二手配件，性能和質量都不能保證，花錢換了也遠達不到你想像中的效果。所以並不建議你這樣升級，沒必要。
你上淘X，上有好多400~500的二手主機，配置都比你現在的強多了，你不想多花錢的，可以考慮下這些主機。
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如果主機預算2300內裝新配件，建議裝AMD的集成核顯，雖然專業軟體應用最好是用INTEL，但必需配獨顯。
方案一：
AMD A10-5800K 870元
梅捷SY-F2A85+節能版 550元 大板 （梅捷SY-F2A55M-RL 390元 小板）
金士頓DDR3 1600 4G駭客神條套裝(2GX2)200元雙通道內存模式
希捷Barracuda 500G 16M SATA3 330元
長城雙動力BTX-380P4 300W 180元
DVD刻錄機110元
機箱60
這個配置沒有獨顯，可留以後手頭松動直接裝塊800~1000左右級別的A卡。但現在用的CPU核顯 HD 7660D是目前性能最好的。比一般600塊以下入門級獨顯還強，和N630和R6670這級別的型號類似，比這些型號的D3版還強，比這些型號的D5版弱。所以就算前期也有不錯的畫面處理性能。
方案二：
Intel酷睿i3 3220/盒裝 750元 全新第三代I3
微星B75MA-E33 480元
金士頓DDR3 1600 4G駭客神條套裝(2GX2)200元雙通道內存模式
希捷Barracuda 500G 16M SATA3 330元
長城雙動力BTX-380P4 300W 180元
DVD刻錄機110元
機箱60
這個配置同樣沒獨顯，因核顯性能遠不好方案一中的AUP，前期沒裝獨顯時的圖像處理性能不如方案一。但如以後同樣升級一塊800~1000級別的獨立N卡，那整體性能比方案一強多了。因CPU性能一直是AMD的弱項。
❹ 70邁行車記錄儀
70邁行車記錄儀不好，只能錄二天視頻
❺ thinkpad t系列好在哪裡
首先T系列是ThinkPad經典商務系列。
早在IBM時期就已經存在過的，其前身為IBM ThinkPad 600，
2000年，IBM ThinkPad的產線進行了整合，其中原IBM ThinkPad 600系列更名為T系列，第一代T系列：T20問世。
自2000年第一代T系列一直延續至今，19年的光輝歲月。
T系列，因「Thin & light for Travel」中的字母「T」而得名，代表「性能與便攜的完美平衡」，每一代T系列產品都秉承著這樣的設計理念。在注重一定便攜性的同時又兼顧擴展性、性能，在它們之中形成了一種平衡點。
T系列，一直以來都是ThinkPad家族中的「中流砥柱」，這是最讓我為之吸引的氣質。
所以傲雪本人手中擁有了多台T系列產品：
T410i、T420、T420s(已轉讓)、T530、T440(已轉讓)、T460s，未來可能會購置T480s
❻ 請幫我翻譯這段話吧
它正在誘惑說，他們是空前的, 是不請求疑問在手邊。
先例是什麼他們的過去經驗的人們發現指導他們的現在行動。 相反地，行動通常反映經驗的指導。 無真的空前。 以一種新的情形面對了,人對熟悉的一些比喻它而且根據被感覺的類似塑造他們的回應。 在計算機的情況，是新的是在練習中使它的在下面理論上的結構可實現的可靠的電子電路。 基本上，它是在真正的時間和空間的限制裡面操作了的一部 Turing 機器。 那麼多是空前的。 超過那，先例作形了計算機。 Turing 機器是一個可能無窮類型的特別的申請一個開著的輪廓。 計算機要如何被用仰賴經驗和要使用它的人的期待或者要設計它讓其它使用。
當來自在 " 軟體危機 " 的起源上的 1950 到 1970個聚焦的計算機業的發展的歷史的部份之時, 我現在正在嘗試決定什麼人們
當他們最初開始談論 " 軟體工程學 " 的時候，認為。雖然一位作家已經建議，期限 1965,2 開始了它首先在 1967 年進入通常的通貨了 , 研究何時在北大西洋公約組織科學委員會的計算機科學上聚集在主題上要求一個國際的會議。 當布萊恩 Randell 和彼得 Naur 在對他們的進行的版本的介紹方面指出之時,"片語 '軟體工程學' 故意地被選擇當做在氣人的 , 在暗示對軟體產品的需要方面是 [ 基礎的 ] 在理論上基金會的類型和實際的訓練上 [,] 哪一在工程學的確定部門中是傳統的 ."
❼ dna結構不同所以抗生素作用效果不同 為什麼
可以做150g/ml、 200g/ml、300g/ml三個濃度進行篩選。為分析轉化的功能和表達需要DNA穩定轉染至宿主細胞染色體.外源基因進入細胞後,部分能夠通過細胞質進入細胞核內,根據細胞類型,至多80%的進入 核內的外源DNA得到瞬時表達.極少數情況下,進入細胞的外源DNA通過系列非同源性分子間重組核連接,形成巨大的***結構最終整合進細胞染色體.細胞 基因組自由部分表達,所以整合並不一定意味著表達,只有整合到表達區的基因才會表達,而且整合到不同的染色體區段的外源基因的表達的量也是不同的.由於攝 取、整合、表達外源基因是小概率事件,通常根據新表型篩選穩定轉染體。一般情況下這種新表型由共轉染的編碼抗生素抗性基因提供.細菌Tn5轉座子序列 （neo抗性基因）攜帶的氨基糖苷磷酸轉移酶可以將G418轉變成無毒形式.G418是一種氨基糖類抗生素,其結構與新黴素、慶大黴素、卡那黴素相似,它 通過影響80S核糖體功能而阻斷蛋白質合成,對原核和真核等細胞都有毒性,包括細菌、酵母、植物和哺乳動物細胞,也包括原生動物和蠕蟲.是穩定轉染最常用 的選擇試劑.當neo基因被整合進真核細胞基因組合適的地方後,則能啟動neo基因編碼的序列轉錄為mRNA,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的高效 表達,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養基中生長.G418的這一選擇特性,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方面得以廣泛 應用.在進行轉染時細胞膜受到影響,抗生素可能對細胞產生較大影響,加上G418有殺菌作用,所以有人主張轉讓時不加其它抗生素.其實G418本身有很好 的殺菌效果,在用G418進行篩選的過程中很少會發生污染.但有一點,在脂質體轉染時所 用培養基中最好不加任何抗生素.可能是脂質體對細胞膜有影響,可能此時加抗生素對細胞損傷較大.因為慶大黴素、鏈黴素、G418均是氨基糖甙 類葯物,其葯理作用完全一樣.所以沒有必要再用,而且由於另外抗生素的添加實際增加氨基糖甙類葯物的濃度,劑量有誤差,不利於各實驗室之間的交流,在實際 操作中,培養液中有抗生素對細胞培養與篩選影響不大.Protocal1.G418的配製： 取1g G418溶於1ml 1M的HEPES液中,加蒸餾水至10ml,過濾消毒,4度保存.2.細胞培養：取待測培養細胞,制備成細胞懸液,按等量接種入多孔培養板中,培養6小時左右開始加葯.3.制備篩選培養基：在100g/ml～1000g/ml范圍內確定幾個梯度,比如先做個100g/ml、400g/ml、800g /ml、1000g/ml,按梯度濃度用培養基稀釋G418製成篩選培養基.4.加G418篩選： 吸除培養孔中培養基,PBS洗滌一次,每孔中加入不同濃度的篩選培養基.5.換液：根據培養基的顏色和細胞生長情況,每3~5天更換一次篩選培養基.方法同4.6.確定最佳篩選濃度：在篩選10～14天內能夠殺死所有細胞的最小G418濃度即為最佳篩選濃度.在第一輪就篩選出最佳G418濃度的可能性不 大,最有可能的是出現這種情況：用某一濃度G418的量在篩選14天後還不能殺死細胞,而用下一個梯度的G418的量在10天前就看不到活細胞了.假如是 400g/ml不能殺死細胞,而800g/ml在第5天就把所有細胞都殺死了,則可以再用500g/ml、600g/ml、700g/ml進一 步篩選,以確定最佳篩選濃度!心得：由於特性明確的細胞系G418的最佳用量還是比較穩定的,所以有時候不需要在這么大范圍內進行篩選。
❽ 最近想買智能手機，在網上看到佳通G2佳域G2首派A80S決的很強大價格也便宜就不只這幾個牌子是不是山寨求解
其實手機不能單純的看硬體配置，比如酷派，很多款配置不低，可就是系統優化做得超級垃圾。
硬體只是一個方面，軟體也很重要，它們用的都是聯發科MTK的平台，跟之前的山寨機用的是同一家公司的平台，這個平台本身非常好，但是很多山寨廠的技術不過關，所以生產的手機很垃圾！據我觀察，你提到的手機配置真的不低，但是價格很低，所以我覺得，如果很在意價格，不在意穩定性的話，可以購買
❾ 2500左右筆記本推薦
無解。
這個價位，如果你只是想1080P無壓力，完全沒問題
但你說還要製作視頻，這個壓力了，還有大型3D游戲，更壓力了
我給你稍微科普一下顯卡
你挑電腦顯卡的時候就會注意到，有一部分顯卡的顯存只用GDDR3甚至GDDR2，但容量卻高達1~2G；而有些顯存則瘋狂啟用到GRRD5的高頻率，可容量卻只有0.5~1G
這里還涉及到商業營銷策略，也就是主動產品線和被迫產品線，這個不說，就說技術
高容量，低頻率，適合類似於PS此類軟體，點陣圖編輯，需要大量顯存，但對速度要求不算太高。
低容量，高頻率，適合矢量類應用程序，比如CAD，或3D建模的，需要大量的計算，但並不要求有多少存儲空間。
至於你說的電影，要看用CPU解析還是用GPU解析，源視頻用的什麼樣的壓縮方法、用什麼樣的解碼器還原畫面，比如說，是點陣圖類的更多，還是矢量類的更多，是固定還是動態，這都有關系。
你說的游戲我沒玩過，但3D引擎工作原理是一樣的，與畫面的刷新率（幀）和貼圖質量有關
綜合上面來說
看電影，要求CPU（GPU）能力強
做視頻，要求CPU處理能力強，且顯存容量大，內存容量同樣要求很大
3D游戲，要求顯存頻率高，而且如果你還想畫面質量好，顯存至少要2G+
而且，我還真不知道有15吋以上屏幕的本，那得多大，多難看...
所以按你的要求，2500價位，別說本，台式都配不下來。你只能去尋求二手市場了。但話說回來，能達到這樣性能要求的本，目前市場價至少4000+，這是能達到你要求的最低配置，得5000元級能正常。這樣的本，即便是二手，也是很新的本，也不可能有2500的價位。換句話說，能賣你2500的二手本本，配置基本不達標。所以你這個要求是無解。除非你能遇到奇跡：一個新本，買回來就不想要了，而且沒什麼問題，還願意低價轉讓。可遇不可求。臟物倒是有可能...不過...犯法......