细胞培养基有效期验证

① 细胞培养基的细胞培养基发展趋势

用来在无血清条件下促使特殊类型的细胞生长或进行专门应用的培养基。需要添加生长因子和/或细胞因子，含有个别蛋白或大量蛋白组分。其主要优点：
(1)增加确定性;
(2)性能更一致;
(3)容易进行纯化和下游加工;
(4)提高制品安全性和/或产量。 培养基中不包含有蛋白、水解产物或未知结构的组分，所有的成分均有已知的化学结构。
培养基的品质鉴定
外观
颜色、粉末细度须均匀。
溶解性
培养基完全溶解，可以避免培养基内营养成分的流失。
pH值
哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度，同时pH值的测定也可以检查培养基的批间差异。
水分
培养基的营养成份很丰富，利于微生物的滋长，因此水分的含量控制可以延长有效期。
冰点渗透压
细胞必须生活在合适的渗透压环境中;同时渗透压值的测定也可以检查培养基的批间差异。
菌落总数
粉末培养基不是无菌制剂，培养基本身的营养成分很丰富，容易滋生微生物，因此菌落的控制可以延长有效期
细胞生长试验
可检查细胞培养基是否有促生长的能力，以及是否有不利细胞生长的毒素。
细菌内毒素
为满足生物制品细菌内毒素的控制要求，作为生物制品生产原料的培养基同样需要细菌内毒素控制。
稳定性
确定产品的储存、运输条件，产品的保质期限。
一致性
验证产品的均一性。

② 利用细胞体外培养方法验证

A细胞分泌胰高血糖素,B细胞分泌胰岛素
1.胰岛A细胞是在血糖低的时候分泌 提高血糖的激素 所以不能用高糖的培养液去培养 因该用低糖培养液培养
2.应为是高糖所以上面的胰岛A细胞不分泌激素,所以过滤出来的还是高糖培养液,胰岛素是用来降低血糖的 看似可以但是 缺少对照 所以不对
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③ 细胞生长 培养基过期了还可以用吗

不可以了，细胞培育需要无菌环境~

④ 配置好的平板培养基保存有效期需不需要经过验证

不用验证来也可以，因为如果配置自好的平板培养基保存时间过长的话会发干，或者长细菌。一般都在一个月左右使用完就可以了。
如果不放心的话也可以去验证。
将制备好的培养基放在恒温箱中保温1到2天看有无菌落生长,如果没有菌落生长说明制作合格,反之则不合格.

⑤ 细胞培养基过期为什么养细胞状态就不好了

因为培养基中的物质稳定性跟不上了。
一般培养基的保质期都会比真正的不能用的时间要提前一些。
可以根据实验经费等情况进行选择。

⑥ schneider's drosophila medium细胞培养基过期了，还能不能用

如果过期了，培养基里的化学成分就会发生变化，可能会产生毒素等不利于细胞生长的物质,而且过期培养基一般都会染菌，细胞培养对无菌条件要求比较苛刻，建议不要用过期的培养基，

⑦ 细胞培养基过期还能用吗

细胞培养基过期还能用
灭菌后倒掉。
培养基注意事项
培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项：
确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。
其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。
另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自独立的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。

⑧ 如何对细胞培养进行快速正确的检测

可用直接培养法检测细胞培养箱内的支原体污染。
培养基准备： 基本配方为Difco PPLO broth（60%），马血清（20%），15%酵母膏溶液（10%），10x储存液（10%）。由于培养时间长，可加50u/ml青霉素至10x储存液 或加入乙酸铊（1：2000）至培养基中以防止其他细菌的污染。 10x储存液（1升）： 称取50克葡萄糖，10克L-盐酸精氨酸溶于1升蒸馏水中。用0.22μm无菌过滤膜过滤除菌，分装100ml至瓶中，-70℃保存。 液体培养基（1升）： 称取21克Difco PPLO broth，0.02克酚红于600ml蒸馏水中加热搅拌溶解。灭菌121℃15分钟灭菌。待温度降低至室温后于无菌操作台内加入200ml马血 清，100ml 15%酵母膏溶液及100ml解冻的10x储存液，混合均匀后分装至已灭菌的有盖螺旋试管中，10ml/管。4℃保存，保存期限为1个月。 固体培养基： 称取21克Difco PPLO broth，0.02克酚红，15克Bacto agar于600ml蒸馏水中，加热溶解。121℃15分钟灭菌，放入50℃水浴中，待温度降至50℃时于无菌超净台内加入200ml马血清，100ml 15%酵母膏溶液及解冻的10x储存液，混合均匀后倒入60x15mm无菌培养皿中，5ml/皿。保存于4℃，期限为1个月。 步骤：取1ml细胞培养液或0.2ml细胞悬浮液接种于液体培养基中，置于37℃培养2周，观察是否有浑浊或pH变化。培养一 周及两周后，分别取0.1ml液体培养液涂于琼脂平板上，倒置于厌氧缸中，37℃培养至少3周，持续观察是否有支原体菌落出现。另取1ml细胞培养液或 0.2ml细胞悬浮液涂于琼脂平板上，37℃厌氧培养3周，持续观察是否有支原体菌落出现。另作正负对照组，正对照为Acholeplasma laidlawii（ATCC 23206）与M. arginini（ATCC 23838）。负对照组为待测细胞的新鲜培养液。 结果判断：支原体生长较慢，所以先在液体培养基中培养1-2周增殖后再培养于琼脂平板上，至少培养3周后才能断定是否有支原体 污染。所以总个测试要5周才知道正确结果。典型的支原体菌落是荷包蛋形，是由于支原体网琼脂下层生长所致，为无色透明菌落，大小约为10-55μm 。但是并非所有支原体都是荷包蛋菌落，有些是圆形或类似黏菌类形态。区分细胞或是气泡造成的类似菌落，可将其自琼脂平板上切下，重新培养于液体培养基中， 培养一周后再接种入琼脂平板，细胞和菌落则不会生长。

⑨ 细胞培养基的保存应该注意什么

细胞培养基的保存1.干粉，买了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我认为没有必要。但4度是非常必要的。保证期是有提示的。2.配好的无血清培养基一定保存在4度，保存不要超过3个月。用时根据提示要加入谷胺酰胺。3.加入血清的培养基，最好保存在4度不要超过1个月，从时间太长，活性下降。当然稍微长点也不一定出问题。但是根据细胞而定;如果原代培养，最好新鲜，如果是肿瘤细胞，或仅维持传代就不太要紧。但是原则是越新越好。 可以到生物帮那里查找这样的信息啊，那里实验技术方法与技巧等都是蛮丰富的。