『壹』 氨苄抗性和卡那抗性载体哪个更稳定
必须带有抗性。农杆菌里面有辅助质粒,是使得菌株有抗性的。但不一定是利福平抗性,还有其他的。
『贰』 农杆菌本身有氨苄抗性吗 谢谢 用氨苄抗性的载体转化农杆菌总是染菌
首先确认下你的氨苄板子有没有问题,会不会配置时间过长或者是由于晒了阳光等导致氨苄失效。
然后想想你的操作有没有问题。
你转化的农杆菌是否是商业化的感受态,如果是商业化的感受态,那一般不会有问题。
如果是你们自己的菌种,好像农杆菌的抗性很麻烦,有些菌种有不同的抗生素抗性甚至多种抗生素抗性,实在不行,就只能分离纯化了。
『叁』 关于氨苄青霉素有效期的问题,属于生物方面的培养基配置。
把培养基加热到60-70℃,或不严格的话就再灭个菌,再重新加一次氨苄。养养一般的大肠杆菌是没什么问题的。
严格要求的话,像要用来做蛋白表达什么的,就重新配吧~
『肆』 氨苄常温放久了还能用么1001氨苄常温放久了还能用么 - 百度
把培养基加热到60-70℃,或不严格的话就再灭个菌,再重新加一次氨苄.养养一般的大肠杆菌是没什么问题的.
严格要求的话,像要用来做蛋白表达什么的,就重新配吧~
『伍』 转化的感受态有氨苄抗性但是提不出来质粒
这个问题可以从几外方面着用排查,一个,氨苄是否失效?失一个厂家的或者批次的试一下。
细菌是否产生抗性?我不加质粒,直接用感受态涂板,看是否能长出来。
质粒提取是否出问题了?挑起菌落,去摇菌,而不是用菌落去提质粒。
最后,你是如何知道没有质粒的?电泳检测还是PCR检测?如果电泳检测,可能是质粒含量太低,检测不出来(可以将提出来的质粒重新转化一次,这样会比连接产物的效率高)。如果是PCR检测,一个是PCR系统是否正常?另一个,是否提出来的质粒并不是我们克隆进去的质粒(感受态细胞受到质粒污染了)。
『陆』 请问:做好的Amp平板放在冰箱里保存久了Amp会不会失效啊
不会,不过要看你的amp的有效期有多长,其实一般过了保质期问题也不大,有时候为了节约钱我也还在用,不过还是小心点好。
你在养什么细菌啊,是不是养大肠杆菌要氨苄抗性的质粒啊。
请问你是哪个学校微生物实验室的?
『柒』 氨苄青霉素抗性是什么
恩,青霉菌等分泌的一种物质。使周围的菌中对它有抗性的存活。没抗性的死亡。有选择性。
『捌』 氨苄抗性筛选的单菌落在含氨苄的液体培养基里为啥不长
我也遇到过这个问题,有两种情况。
1、如果是出现在转化后,则要看转化后长出菌落的多少。若这个平板上密密麻麻都是菌落,有可能是氨苄失效或部分失效(毕竟要趁培养基未凝的时候倒平板,可能加入氨苄时温度高了点;又或者是平板放存时间过久)。若平板上只是零星长了几个菌落,则可以考虑是杂菌或活性不好的转化菌。个人认为固体氨苄培养基的环境比液体氨苄培养基优越的多,这也是为什么长时间冻存的菌会先划平板活化一下的原因。
此时建议重新倒平板,或重新做连接转化。
2、我还遇到过筛选出来的目的菌在冰箱冻存时间过久,复活时在平板上生长,但在液体培养基中繁殖极度缓慢,基本不长的情况。
后来,我用保存的质粒重新转入了感受态细胞,解决了这个问题。
希望以上对你有所帮助。我觉得实验中,找原因固然关键,但有时候重新做一次实验更能解决问题。因为,很多不成功的结果是由偶发因素导致的。
『玖』 氨苄青霉素抗性基因作用是
氨苄青霉素抗性基因(Ampicillin resistance gene, ampr) 氨苄青霉素抗性基因是基因操作中使用最广泛的选择标记,绝大多数在大肠杆菌中克隆的质粒载体带有该基因。青霉素可抑制细胞壁肽聚糖的合成,与有关的酶结合并抑制其活性,抑制转肽反应。氨苄青霉素抗性基因编码一个酶,该酶可分泌进入细菌的周质区,抑制转肽反应并催化 β-内酰胺环水解,从而解除了氨苄青霉素的毒性。
『拾』 在Lb的培养基中加入氨苄后,一直放在室温7天,氨苄抗性会消失。
氨苄放置37度的环境中的话,一般17~18个小时效果就不好了。
把培养基加热到60-70℃,或不严格的话就再灭个菌,再重新加一次氨苄.养养一般的大肠杆菌是没什么问题的.
严格要求的话,像要用来做蛋白表达什么的,就重新配吧~