A. 发明分案什么情况下才能申请呢
国家为了防止专利权人只交一份钱却申请保护两项专利权，或者有下列情形的需分案申请
(1)原权利要求书中包含不符合单一性规定的两项以上发明。
(2) 在修改的申请文件中所增加或替换的独立权利要求与原权利要求书中的发明之间不具有单一性。
例如，一件包括产品、制造方法及用途的申请，经检索和审查发现，产品是已知的，其余的该产品制造方法独立权利要求与该产品用途独立权利要求之间显然不可能有相同或者相应的特定技术特征，因此它们需要修改。
上述情况的分案，可以是申请人主动要求分案，也可以是申请人按照审查员要求而分案。应当指出，由于提出分案申请是申请人自愿的行为，所以审查员只需要求申请人将不符合单一性要求的两项以上发明改为一项发明，或者改为属于一个总的发明构思的两项以上发明，至于修改后对其余的发明是否提出分案申请，完全由申请人自己决定。
B. 什么是专利的分案申请
所谓专利的分案申请，是指申请人申请的专利包括两项以上的发明、实用新型或者外观设计时，申请人在原申请提出之后，收到国务院专利行政部门批准授予专利通知之日之前或者收到国务院专利行政部门批准授予专利通知之日起两个月内可以行使向国务院专利行政部门提出将专利申请分立成两项以上的专利申请。
申请人提出分案申请必须符合下列条件：
一、提出分案申请，申请人申请的一项专利必须包括两项以上的发明、实用新型或者外观设计；
二、提出分案申请必须在国务院专利行政部门下达授予专利通知之日起两个月内，超过两个月的时间规定，视为放弃分案申请；
三、提出分案申请的专利，不得改变原申请专利的类别。
C. 哪些条件可以提出发明专利的分案申请
提出发明专利的分来案申请应当自具备以下五个条件：
（一）一件专利申请中应当包括两项以上发明；
（二）分案申请的发明人也应当是原申请的发明人或者是其中的部分成员；
（三）分案申请应当以原申请（第一次提出的申请）为基础提出；
（四）专利局已对原申请作出授予专利权的决定。如果专利申请已经被驳回、撤回或者视为撤回的，不能提出分案申请；
（五）申请人应当自收到授予专利权通知之日起２个月内提出。
D. 专利的分案申请指的是什么
所谓专利的分案申请复，是指申请制人申请的专利包括两项以上的发明、实用新型或者外观设计时，申请人在原申请提出之后，收到国务院专利行政部门批准授予专利通知之日之前或者收到国务院专利行政部门批准授予专利通知之日起两个月内可以行使向国务院专利行政部门提出将专利申请分立成两项以上的专利申请。
申请人提出分案申请必须符合下列条件：
一、提出分案申请，申请人申请的一项专利必须包括两项以上的发明、实用新型或者外观设计；
二、提出分案申请必须在国务院专利行政部门下达授予专利通知之日起两个月内，超过两个月的时间规定，视为放弃分案申请；
三、提出分案申请的专利，不得改变原申请专利的类别。
E. 一个总的发明构思两项以上发明申请一项专利的例子
总的发明构思两项以上发明申请例子:包括产品\方法和应用等.
权利要求书
1、一种对痢疾志贺氏菌12型和大肠杆菌O152的O-抗原特异的核苷酸，其特征在
于它是如SEQ ID NO：1所示的分离的核苷酸，全长12235个碱基。
2、按照权利要求1所述的对痢疾志贺氏菌12型和大肠杆菌O152的O-抗原特异的
核苷酸，其特征在于它是由10个基因组成，它们都位于galF基因和gnd基因之间。
3、按照权利要求2所述的对志痢疾贺氏菌12型和大肠杆菌O152的O-抗原特异的核
苷酸，其特征在于所述的基因是：
关于转运和加工的基因，包括wzx基因或与wzx有相似功能的基因，wzy基因或与
wzy有相似功能的基因；
糖基转移酶基因，包括orf5、orf7、orf9、orf10基因；其中所述的基因：
orf5是SEQ ID NO：1中的4626至5663碱基的核苷酸；
wzx是SEQ ID NO：1中的5663至6874碱基的核苷酸；
orf7是SEQ ID NO：1中的6877至7869碱基的核苷酸；
wzy是SEQ ID NO：1中的7882至8955碱基的核苷酸；
orf9是SEQ ID NO：1中的8960至9721碱基的核苷酸；
orf10是SEQ ID NO：1中的9718至10788碱基的核苷酸。
4、按照权利要求1-2所述的对痢疾志贺氏菌12型和大肠杆菌O152的O-抗原特异的
核苷酸，其特征在于它是源于所述的wzx基因、wzy基因或糖基转移酶基因orf5、orf7、
orf9、orf10基因；或糖合成路径基因中的寡核苷酸；以及它们的混合或它们的重组。
5、按照权利要求4所述的对痢疾志贺氏菌12型和大肠杆菌O152的O-抗原特异的核
苷酸，其特征在于所述的寡核苷酸是：
源于orf5的寡核苷酸对：
SEQ ID NO：1中的4866至4886碱基的核苷酸和5573至5591碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的5156至5176碱基的核苷酸和5587至5595碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的4641至4660碱基的核苷酸和5302至5320碱基的核苷酸；
源于wzx的寡核苷酸对：
SEQ ID NO：1中的6189至6207碱基的核苷酸和6731至6750碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的5713至5733碱基的核苷酸和6724至6741碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的6463至6481碱基的核苷酸和6821至6839碱基的核苷酸；
源于orf7的寡核苷酸对：
SEQ ID NO：1中的7024至7041碱基的核苷酸和7779至7800碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的6972至6992碱基的核苷酸和7578至7596碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的7131至7148碱基的核苷酸和7693至7674碱基的核苷酸；
源于wzy的寡核苷酸对：
SEQ ID NO：1中的7883至7903碱基的核苷酸和8903至8921碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的8049至8069碱基的核苷酸和8876至8894碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的8197至8214碱基的核苷酸和8197至8214碱基的核苷酸；
源于orf9的寡核苷酸对：
SEQ ID NO：1中的9020至9040碱基的核苷酸和9630至9647碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的8982至9000碱基的核苷酸和9443至9462碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的9165至9183碱基的核苷酸和9525至9543碱基的核苷酸；
源于orf10的寡核苷酸对：
SEQ ID NO：1中的9752至9770碱基的核苷酸和10567至10586碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的9165至9183碱基的核苷酸和9525至9543碱基的核苷酸，
SEQ ID NO：1中的9934至9952碱基的核苷酸和10513至10530碱基的核苷酸。
6、权利要求1所述的对痢疾志贺氏菌12型和大肠杆菌O152的O-抗原特异的核苷酸
在体外检测表达O-抗原的细菌的应用。
7、按照权利要求1所述的对痢疾志贺氏菌12型和大肠杆菌O152的O-抗原特异的核
苷酸的应用，其特征在于它作为引物用于PCR、作为探针用于杂交反应与荧光检测、制造
基因芯片或微阵列用于体外检测痢疾志贺氏菌12型或大肠杆菌O152。
8、权利要求1所述的对痢疾志贺氏菌12型和大肠杆菌O152的O-抗原特异的核苷酸
的分离方法，其特征在于它包括下述步骤：
1)基因组的提取
在LB培养基中37℃过夜培养志贺氏菌，离心收集细胞，用pH值为8.0的Tris-HCl
和EDTA重悬细胞，37℃温育20分钟后加入溶菌酶裂解细菌，加入蛋白酶K和SDS降解蛋
白质，再加入RNase去除RNA；加等体积酚抽提混合物，取上清再用等体积的酚∶氯仿∶
异戊醇抽提两次除其中的酶和蛋白，再用等体积的乙醚抽提除去残余的酚；用2倍体积乙
醇沉淀DNA，用玻璃丝卷出DNA后用70％乙醇洗DNA，最后将DNA重悬于30μlTE中，基因
组DNA通过0.4％的琼脂糖凝胶电泳检测；
2)通过Long PCR扩增痢疾志贺氏菌12型中的O-抗原基因簇
首先根据经常发现于O-抗原基因簇启动子区的JumpStart序列设计上游引物-ATT
GTG GCT GCA GGG ATC AAA GAA AT，再根据O-抗原基因簇下游的gnd基因设计下游引物
-TAG TCG CGT GNG CCT GGA TTA AGT TCG C；用Boehringer Mannheim公司的Expand Long
Template PCR方法扩增O-抗原基因簇，PCR反应程序如下：在94℃预变性2分钟；然后
94℃变性10秒，60℃退火30秒，68℃延伸15分钟，这样进行30个循环；最后，在68
℃继续延伸7分钟，得到PCR产物；合并6管long PCR产物，并用Promega公司的Wizard
PCR Preps纯化试剂盒纯化PCR产物；
3)O-抗原基因簇文库的构建
用被修改的Novagen DNaseI shot gun法构建O-抗原基因簇文库，反应体系是300ng
PCR纯化产物，0.9μl 0.1M MnCl2，1μl 1∶2000稀释的1mg/ml的DNaseI，反应在室温中
进行；酶切10分钟使酶切后的DNA片段大小集中在1kb-3kb之间，而后加入2μl 0.1M EDTA
终止反应，合并4管同样的反应体系，用等体积的酚抽提一次，用等体积的酚∶氯仿∶
异成醇混合溶液抽提一次，酚∶氯仿∶异戊醇混合体积比例为25∶24∶1；再用等体积的
乙醚抽提一次后，用2.5倍体积的无水乙醇沉淀DNA，并用70％乙醇洗沉淀，最后重悬于
18μl水中；随后在此混合物中加入2.5μl dNTP，其中包含1mMdCTP、1mMdGTP、1mMdTTP
和10mMdATP，1.25μl 100mM DTT和5单位的T4DNA聚合酶，11℃30分钟，将酶切产物
补成平端，75℃终止反应后，加入5单位的Tth DNA聚合酶及其Tth DNA聚合酶的缓冲液，
并将体系扩大为80μl，使DNA的3’端加dA尾，此混合物经混合体积比为24∶1的氯仿∶
异戊醇混合液抽提和乙醚抽提，然后与pGEM-T-Easy载体于16℃连接24小时，总体积为
90μl，其中有25单位的T4DNA连接酶和9μl的10倍T4DNA连接酶的缓冲液，最后用1/10
体积pH＝5.2的3M NaAc和2倍体积的无水乙醇沉淀连接混合物，70％乙醇洗后溶于30μl
水中得到连接产物，用Bio-Rad公司的电转化感受态细胞的制备方法制备感受态大肠杆
菌DH5α细胞，取2-3μl连接产物与50μl感受态大肠杆菌DH5α混合后，转到Bio-Rad
公司的0.2cm的电击杯中电击，电压为2.5千伏，时间为5.0毫秒-6.0毫秒，电击后立即
在杯中加入1ml的SOC培养基使菌复苏，然后将菌涂在含有氨苄青霉素、X-Gal和IPTG
的LB固体培养基上37℃过夜培养，次日得到蓝白菌落；将得到的白色菌落即白色克隆转
到含有氨苄青霉素的LB固体培养基上培养，同时从每个克隆中提取质粒并用EcoRI酶切
鉴定其中的插入片段的大小，得到的白色克隆群构成了痢疾志贺氏菌12型的O-抗原基因
簇文库；
4)O-抗原基因簇全序列的获得
从O-抗原基因簇文库中挑选插入片段在700bp以上的120个克隆由上海生物工程有
限公司用ABI377型DNA自动测序仪对克隆中的插入片段单向进行测序，使序列达到80％
的覆盖率，剩余20％的序列再根据已得到的序列设计引物，再从痢疾志贺氏菌12型的基
因组DNA中直接PCR并对PCR产物测序，从而获得O-抗原基因簇的所有序列，用英国剑
桥Medical Research Council分子生物学实验室出版的Staden package软件包的Pregap4
和Gap4软件拼接和编辑所有的序列，从而得到痢疾志贺氏菌12型的O-抗原基因簇的核
苷酸全长序列，序列的质量主要由两个方面来保证：(1)对每个基因组作6个Long PCR
反应，然后混合这些产物以产生文库；(2)对每个碱基，保证3个以上高质量的覆盖率；
5)O-抗原基因簇结构的获得
用The National Center for Biotechnology Information的orffinder发现痢疾志贺氏
菌12型O-抗原基因簇的核苷酸序列中的基因，找到10个开放的阅读框，用blast系列
软件与GenBank中的基因比较以发现这些开放的阅读框的功能并确定它们是什么基因，再
用英国sanger中心的Artemis软件完成基因注释，用Clustral W软件做DNA和蛋白质序
列间的精确比对，最后得到痢疾志贺氏菌12型的O-抗原基因簇的结构。
F. 怎么做发明专利的分案申请
一件专利申请包括两项以上发明的，申请人可以主动提出或者依据审查员的审查意见提出分案申请。分案申请应当以原申请（第一次提出的申请）为基础提出。分案申请应当在请求书中填写原申请的申请号和申请日；对于已提出过分案申请，申请人需要针对该分案申请再次提出分案申请的，还应当在原申请的申请号后的括号内填写该分案申请的申请号。
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G. 两项以上发明专利含两项吗
你是不是想问跟分案申请有关的内容啊，在专利局内部，不管是发出的审查意见通知书，还是关于事务处理方面，以上都是包含本数的，所以两项以上包含两项的。
H. 如何提出发明专利的分案申请
根据我国《专利法实施细则》的规定，一件专利申请包括两项以上发明的，申请人可以自收到专利局对原申请作出授予专利权通知书之日起两个月期限届满之前提出分案申请。一、申请条件由上可知，提出发明专利的分案申请应当具备以下五个条件：（一）一件专利申请中应当包括两项以上发明；（二）分案申请的发明人也应当是原申请的发明人或者是其中的部分成员；（三）分案申请应当以原申请（第一次提出的申请）为基础提出；（四）专利局已对原申请作出授予专利权的决定。如果专利申请已经被驳回、撤回或者视为撤回的，不能提出分案申请；（五）申请人应当自收到授予专利权通知之日起２个月内提出。二、申请要求（一）提出分案申请的，可以保留原申请日，享有优先权的，可以保留优先权日，但是不得超过原申请公开的范围。（二）分案申请的请求书中应当写明原申请的申请号与申请日。在提出时，申请人应当提交原申请文件副本；原申请享有优先权的，应当提交原申请的优先权文件副本。（三）对于已提过分案申请，申请人需要针对该分案申请再次提出分案申请的，还应当在原申请的申请号后的括号内填写该分案申请的申请号。（四）发明专利的分案申请不得改变原申请的类别。（五）发明专利的分案申请不得改变原申请的申请人，不相同的，应当提交权利转移证明材料。（六）分案申请除应当提交申请文件外，还应当提交原申请的申请文件副本以及原申请中与本分案申请有关的其他文件副本，如优先权文件副本。
I. 一项项专利有两项独立权利要求,都会受保护吗
那就需要看这两项独立权利要求之间是否具有单一性。如果具有单一性则都可以受到保护。
专利申请单一性原则也是专利申请中的一项基本原则，其意义可有广狭两种理解。狭义的专利申请单一性原则是指一件专利申请的内容只能包含一项发明创造，不能将两项或两项以上的发明创造作为一件申请提出。而广义的专利申请单一性原则不仅包括上面所说的含意，而且还包括同样的发明创造只能被授予一次专利权，同样的发明创造不能同时存在两项或两项以上的专利权。我国《专利法》第三十三条规定，一件发明专利或者实用新型专利申请应当仅限于一项发明专利或者实用新型专利。属于一个总的发明构思的两项以上的发明专利或者实用新型专利，可以作为一件申请提出。一件外观设计专利申请应当限于一种产品所使用的一项外观设计。用于同一类别并且成套出售或者使用的产品的两项以上的外观设计，可以作为一件申请提出。
符合单一性规则或属于一个总的发明构思的多项发明主要有以下六种类型：
（1）两项以上产品或者方法的同类发明；
（2）产品和专用于制造该产品的方法的发明；
（3）产品和该产品的用途的发明；
（4）产品、专用于制造该产品的方法和为实施该方法和该产品的用途的发明；
（5）产品、专用于制造该产品的方法和为实施该方法而专门设计的设备的发明；
（6）方法和为实施该方法而专门设计的设备的发明。
对于不符合单一性的缺陷，可以通过修改和分案来克服，分案可以是申请人主动要求分案，也可以是申请人按照审查员的要求而分案。应当指出，由于提出分案申请是申请人自愿的行为，所以，审查员只需要申请人将不符合单一性要求的两项以上发明改为属于一个总的发明构思的两项以上发明，至于修改后对其余的发明是否提出分案申请，完全由申请人自己决定。
另外，针对一件申请，可以提出一件或者一件以上的分案申请，针对一件分案申请还可以以原申请为依据再提出一件或者一件以上的分案申请。针对一件分案申请再提出分案申请的，若提交日不符合分案申请的递交时间，则不能被允许，除非是为了克服审查员所指出的单一性缺陷。
J. 专利申请中什么是分案申请比如呢
国家抄为了防止专利权袭人只交一份钱却申请保护两项专利权，或者有下列情形的需分案申请(1)原权利要求书中包含不符合单一性规定的两项以上发明。(2) 在修改的申请文件中所增加或替换的独立权利要求与原权利要求书中的发明之间不具有单一性。例如，一件包括产品、制造方法及用途的申请，经检索和审查发现，产品是已知的，其余的该产品制造方法独立权利要求与该产品用途独立权利要求之间显然不可能有相同或者相应的特定技术特征，因此它们需要修改。上述情况的分案，可以是申请人主动要求分案，也可以是申请人按照审查员要求而分案。应当指出，由于提出分案申请是申请人自愿的行为，所以审查员只需要求申请人将不符合单一性要求的两项以上发明改为一项发明，或者改为属于一个总的发明构思的两项以上发明，至于修改后对其余的发明是否提出分案申请，完全由申请人自己决定。