『壹』 谁能帮我分析一下这个DNA凝胶电泳图,第一个为marker第二个为植物DNA第三个为大肠杆菌
没有明确marker的大小,但是你最下面有一团小的物质,估计为RNA,提取或最后溶解的时候注意加RNA酶;
植物DNA基本没有提取到,植物DNA很大,都会在最上面,你提取的质量不好。
大肠杆菌提取的是质粒还是基因组?结果也不是很好。
『贰』 DNA凝胶电泳产生拖带的原因是什么
多数是因为电压太大,还有可能是制胶有问题。
『叁』 DNA琼脂糖凝胶电泳分析
你好!可能是DNA提纯浓度不够,所以会出现拖尾,也有可能是配胶浓度不对,比如1.5%的gel你配成1%,也有可能是电泳时间或者电压、电流调的不对,条带还没有跑到指定位置。建议看相关文献,看别人跑相同的DNA或RNA的条件是什么,然后再根据自己的实验进行优化。
『肆』 DNA的电泳技术是怎么一回事
凝胶电泳是一大类技术,被科学工作者用于分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。 该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶(Ethidium bromide, EB)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,用于以后的克隆技术操作。
琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离DNA片度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA片段。琼脂糖通常用水平装置在强度和方向恒定的电场下电泳。聚丙烯酰胺分离小片段DNA(5-500bp)效果较好,其分辩力极高,甚至相差1bp的DNA片段就能分开。聚丙烯酰胺凝胶电泳很快,可容纳相对大量的DNA,但制备和操作比琼脂糖凝胶困难。聚丙烯酰胺凝胶采用垂直装置进行电泳。目前,一般实验室多用琼脂糖水平平板凝胶电泳装置进行DNA电泳。
琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移速率由下列多种因素决定:
1、 DNA的分子大小:
线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中蠕行,因而迁移得越慢。
2、 琼脂糖浓度
一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。
3、 DNA分子的构象
DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而线状双链DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种限制性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。
4、 电源电压
在低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加,不同分子量的DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长,片段越大,因场强升高引起的迁移率升高幅度也越大,因此电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大,所加电压不得超过5v/cm。
5、嵌入染料的存在
荧光染料溴化乙啶用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状DNA迁移率降低15%。
6、 离子强度影响
电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。
对于天然的双链DNA,常用的几种电泳缓冲液有TAE[含EDTA (pH8.0)和Tris-乙酸],TBE(Tris-硼酸和EDTA),TPE(Tris-磷酸和EDTA),一般配制成浓缩母液,储于室温。
『伍』 琼脂糖凝胶电泳是谁发明的
其实有很多种琼脂糖凝胶电泳,发明者也是不同的, 使用最普遍的装置是Walter Schaffner 发明的水平板凝胶。
Walter Schaffner 这个名字让多少大学生无限的做着琼脂糖凝胶电泳……
『陆』 DNA做凝胶电泳使用来干什么的即有什么意义
分离鉴定DNA。。不同长度还有不同形态(超螺旋,双链,单链,线性等等)的DNA在电场下的泳动速度不一样。而且凝胶上都是小孔洞。大的不能穿梭就被缠住,泳动慢,小的在里面穿梭,泳动快,根据这个原理,使用标准的DNA样品。就可以知道目的DNA的大小,,,进一步可以进行分离纯化等。
『柒』 DNA琼脂糖凝胶电泳
多大浓度的胶?加样孔在上面还是下面?marker多大,尤其最亮那条带是多少?另外,marker好像是在最右边啊。
『捌』 凝胶电泳技术为什么能分离DNA
你指得应该是琼脂糖凝胶电泳
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。
DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同大小的双链DNA几乎具有等量的净电荷,而不同大小的DNA所具有的净电荷就不一样,在同样电场条件下受力也不一样。
其次,DNA分子在凝胶中也会受到阻力影响,阻力有DNA的大小和结构决定。大小就是脱氧核糖核苷酸量(或说分子量大小),分子量DNA的一般结构在相同环境下迁移速度关系如下:环状>双链>环状开环
『玖』 dna琼脂糖凝胶电泳
应该是某一种染液。在电泳结束后,和共轭双键结合,显示DNA条带的量。
具体的商品名并不了解。
『拾』 有人懂DNA凝胶电泳吗
DNA 跑电泳一般采用琼脂糖凝胶电泳法。琼脂糖凝胶电泳法是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大。普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2-20kb。
蛋白质和核酸会根据pH不同带有不同电荷,在电场中受力大小不同,因此跑的速度不同,根据这个原理可将其分开。电泳缓冲液的pH在6~9之间,离子强度0.02~0.05为最适。常用1%的琼脂糖作为电泳支持物。琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低,但它制备容易,分离范围广。