1. Matrigel基質膠成血管實驗求助
2. 基質膠如何快速化開
基質膠如何快速化開操作指南
BD採用磚利技術,從富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤中分離出BD Matrigel 基底膜基質,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,巢蛋白,硫酸肝素糖蛋白等組成,還包含生長因子和基質金屬蛋白酶等。BD Matrigel基底膜基質在室溫條件下,聚合形成具有生物學活性的三維基質,模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能,有利於體外細胞的培養和分化,以及對細胞形態、生化功能、遷移、侵染和基因表達的研究。
BD Matrigel 基底膜基質形成的三維培養基質,可促進上皮細胞、肝細胞、Sertoli細胞、黑色素瘤細胞、血管內皮細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與分化。同時,Matrigel還能影響乳腺上皮細胞的蛋白表達,支持外周神經的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化。高濃度的Matrigel適用於研究體內血管生成和腫瘤細胞遷移及腫瘤模型的建立等。
產品特性
Matrigel基質會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由於酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡後色差即會減少。凍融後,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無菌環境下進行,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,並自然乾燥。應使用預冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。
細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質層表面生長,也可在1mm厚度的Matrigel三維基質內生長。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質的蛋白層,可以用於細胞貼壁,但不能用於細胞的分化研究。
注意:可將凍融後的Matrigel分裝在多個小管,所有分裝均需用預冷的凍存管,迅速冷凍並保存,避免多次凍融。
Matrigel在22-35℃溫度環境下快速成膠,因此溶解時在4℃冰上過夜凍融(4度時會隨著溫度的上升部分成膠)。所有用品在使用前需置於冰浴,必須使用預冷的移液管、吸頭及小管操作Matrigel。成膠後的Matrigel可以在4℃24-48小時後重新呈液態。
推薦包被與成膠方法
注意:為了保證Matrigel基質膜的成膠性能與穩定性,稀釋濃度不應低於1:3,可用無血清培養基稀釋,Matrigel成膠後立即使用。
薄膠成膠方法:
1、凍融後,用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。
2、將需要使用的培養板置於冰上,加入濃度為50μL/cm2生長面積的Matrigel基質。
3、在37℃放置30分鍾,即可使用。
厚膠成膠方法:
1、凍融後,用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。
2、將需要使用的培養板置於冰浴,將培養的細胞與Matrigel基質混合,用移液槍頭使其懸浮於基質中。加入濃度為150- 200μL/cm2生長面積的Matrigel基質。
3、在37℃放置30分鍾,可成膠。可以加入細胞培養的基質,也可使細胞直接生長在膠表面。
薄層包被方法:
1、凍融後,用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀。
2、根據使用需要,採用無血清培養基稀釋Matrigel基質。根據實驗需要確定*佳包被濃度。
3、將稀釋的Matrigel基質包被於所需的培養器皿中,包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育1小時。
4、去除未結合的Matrigel,用無血清培養基輕輕地沖洗。
用BD細胞回收劑(354253)或離散酶(354235)可降解Matrigel基質,冰浴7小時後回收得到細胞。
3. 什麼是基質膠
基質膠是從富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出基底膜基質,其主要成分有層粘連蛋白、Ⅳ型膠原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,還包含生長因子和基質金屬蛋白酶等。
在室溫條件下,Matrigel聚合形成具有生物學活性的三維基質,模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能,有利於體外細胞的培養和分化,可用於對細胞形態、生化功能、遷移、侵染和基因表達等的研究。
(3)基質膠的有效期擴展閱讀:
注意事項:
1、基質膠在22-35℃能夠快速成膠。為了保證Matrixgel基質的成膠性能與穩定性,最終稀釋濃度不應低於3 mg/ml(Matrixgel原液的濃度因批次不同有差異)。可用無血清培養基來稀釋Matrixgel,稀釋後需要立即使用。
2、融化後,用預冷的槍頭混勻Matrixgel基質。
3、將需要使用的培養板置於冰上,按50μL/cm2生長面積的濃度加入Matrixgel基質。
4、在37℃放置30分鍾,此時平板即可使用。
4. balb c裸鼠皮下成瘤實驗步驟基質膠怎麼用
balb c裸鼠皮下成瘤實驗步驟基質膠怎麼用
為沒有用過BD公司的膠原,但使用過Sigma的I型膠原(固體),一般是自己配製成液態,然後根據需要按一定比例添加10x濃縮培養基及血清(保證 細胞的營養),用1M濃度的NaOH調節pH值約7.2,再和細胞混合均勻後添加到培養器皿中,直接放到37度培養箱,一般也就是30分鍾左右即可凝固,等完全凝固後,再在其上添加培養基.膠凝固後,由於其內添加了培養基,所以一般是粉色的.另外,你在添加NaOH及培養基後,測沒測過膠原的pH值?再者會不會在膠原中添加培養基量太多?培養基占的比例大,也會影響到膠原凝固.
5. 胚胎幹細胞培養用基質膠matrigel基質膠怎麼配
細胞與基底膜間的相互作用是調控細胞行為的重要因素之一.基質膠可認為是一種可溶性的基底膜基質.主要成分包括:層黏連蛋白、膠原IV等,同時含TGF-β成纖維細胞生長因子、組織纖維酶原活化因子以及其它在EHS腫瘤中自然表達的生長因子等.基質膠是復雜的混合物,目前BD生化試劑有Matrigel這類成品出售.在室溫下,Matrigel可自動聚集產生類似於哺乳動物細胞基底膜的生物活性基質材料.基質膠用於制備各種要求的基底膜基質,用於細胞信號研究,諸如:鼠腎幹細胞形成腎小管過程中生長因子作用研究,鼠乳腺上皮幹細胞的基因表達研究,transwell的腫瘤侵襲力實驗等. Matrigel可以有效幫助上皮細胞等各類細胞的附著和分化,這些細胞類型包括:神經細胞、肝細胞、哺乳動物上皮細胞、黑色素瘤細胞、血管內皮細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等等.同時,Matrigel還會影響鼠乳腺上皮細胞的蛋白表達水平,支持周圍神經再生和牛輸軟管上皮細胞的分化.
6. 高濃度的基質膠做成瘤實驗需要稀釋么
細胞與基底膜間的相互作用是調控細胞行為的重要因素之一。
基質膠可認為是一種可溶性的基底膜基質。
主要成分包括:層黏連蛋白、膠原IV等,同時含TGF-β成纖維細胞生長因子、組織纖維酶原活化因子以及其它在EHS腫瘤中自然表達的生長因子等。
基質膠是復雜的混合物,目前BD生化試劑有Matrigel這類成品出售。
在室溫下,Matrigel可自動聚集產生類似於哺乳動物細胞基底膜的生物活性基質材料。
基質膠用於制備各種要求的基底膜基質,用於細胞信號研究,諸如:鼠腎幹細胞形成腎小管過程中生長因子作用研究,鼠乳腺上皮幹細胞的基因表達研究,transwell的腫瘤侵襲力實驗等。
Matrigel可以有效幫助上皮細胞等各類細胞的附著和分化,這些細胞類型包括:神經細胞、肝細胞、哺乳動物上皮細胞、黑色素瘤細胞、血管內皮細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等等。
同時,Matrigel還會影響鼠乳腺上皮細胞的蛋白表達水平,支持周圍神經再生和牛輸軟管上皮細胞的分化。
7. 基質膠變性後還能用於細胞貼壁嗎
你好!首先祝你身體健康!沖著你我的緣分,以下我來給你談談關於「局灶節段性腎小球硬化」的問題。
局灶節段性腎小球硬化(fsgs)是病理形態學診斷名詞,fsgs表現為部分(局灶)腎小球和(或)腎小球部分毛細血管袢(節段)發生病變。
fsgs病變局灶化的特徵,使其診斷受組織取材的影響較大。
病變首先累及腎皮質深層的髓旁腎小球;早期就可以出現明顯的腎小管—間質病變。
蛋白尿、腎病綜合征是其突出的臨床表現。
本病對各種治療的反應均較差,疾病呈慢性進行性過程,最終發生慢性腎功能衰竭。
愛心提示:以上介紹用(法、方)葯,請務必咨詢當地正規(中醫)醫院,結合自身生理特點和不同的病理變化,辨證選擇使用。
以上回答如果滿意,請不要辜負我的一片好意,及時採納為答案。
8. matrigel基質膠有人來源的嗎
基質膠塞實驗,將基質膠注入小鼠皮下,觀察葯物對基質膠中血管生成的影響
9. transwell基質膠未完全凝固對結果有影響嗎
影響不是很大。