細胞培養基有效期驗證

① 細胞培養基的細胞培養基發展趨勢

用來在無血清條件下促使特殊類型的細胞生長或進行專門應用的培養基。需要添加生長因子和/或細胞因子，含有個別蛋白或大量蛋白組分。其主要優點：
(1)增加確定性;
(2)性能更一致;
(3)容易進行純化和下游加工;
(4)提高製品安全性和/或產量。 培養基中不包含有蛋白、水解產物或未知結構的組分，所有的成分均有已知的化學結構。
培養基的品質鑒定
外觀
顏色、粉末細度須均勻。
溶解性
培養基完全溶解，可以避免培養基內營養成分的流失。
pH值
哺乳類動物細胞生長需要合適的酸鹼度，同時pH值的測定也可以檢查培養基的批間差異。
水分
培養基的營養成份很豐富，利於微生物的滋長，因此水分的含量控制可以延長有效期。
冰點滲透壓
細胞必須生活在合適的滲透壓環境中;同時滲透壓值的測定也可以檢查培養基的批間差異。
菌落總數
粉末培養基不是無菌制劑，培養基本身的營養成分很豐富，容易滋生微生物，因此菌落的控制可以延長有效期
細胞生長試驗
可檢查細胞培養基是否有促生長的能力，以及是否有不利細胞生長的毒素。
細菌內毒素
為滿足生物製品細菌內毒素的控制要求，作為生物製品生產原料的培養基同樣需要細菌內毒素控制。
穩定性
確定產品的儲存、運輸條件，產品的保質期限。
一致性
驗證產品的均一性。

② 利用細胞體外培養方法驗證

A細胞分泌胰高血糖素,B細胞分泌胰島素
1.胰島A細胞是在血糖低的時候分泌 提高血糖的激素 所以不能用高糖的培養液去培養 因該用低糖培養液培養
2.應為是高糖所以上面的胰島A細胞不分泌激素,所以過濾出來的還是高糖培養液,胰島素是用來降低血糖的 看似可以但是 缺少對照 所以不對
你這個怎麼很想一個武漢市高考畢業題了

③ 細胞生長 培養基過期了還可以用嗎

不可以了，細胞培育需要無菌環境~

④ 配置好的平板培養基保存有效期需不需要經過驗證

不用驗證來也可以，因為如果配置自好的平板培養基保存時間過長的話會發干，或者長細菌。一般都在一個月左右使用完就可以了。
如果不放心的話也可以去驗證。
將制備好的培養基放在恆溫箱中保溫1到2天看有無菌落生長,如果沒有菌落生長說明製作合格,反之則不合格.

⑤ 細胞培養基過期為什麼養細胞狀態就不好了

因為培養基中的物質穩定性跟不上了。
一般培養基的保質期都會比真正的不能用的時間要提前一些。
可以根據實驗經費等情況進行選擇。

⑥ schneider's drosophila medium細胞培養基過期了，還能不能用

如果過期了，培養基里的化學成分就會發生變化，可能會產生毒素等不利於細胞生長的物質,而且過期培養基一般都會染菌，細胞培養對無菌條件要求比較苛刻，建議不要用過期的培養基，

⑦ 細胞培養基過期還能用嗎

細胞培養基過期還能用
滅菌後倒掉。
培養基注意事項
培養基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應該注意以下事項：
確認工作細胞庫是否被污染，確認毒種工作種子批是否被污染，確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用細菌、真菌及支原體無菌試驗來確認並排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中，可以從配製好的培養液中取少量加入營養瓊脂於恆溫培養箱內培養，48小時即可觀察有無污染。
其它：高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證，確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其後的每6個月進行驗證，後者應在每次除菌前、後進行驗證工作(至少應在除菌後進行一次)。
另外，應將有毒區與無毒區嚴格分開，並有各自獨立的空氣凈化系統及孵室，有毒區對無毒區應保持相對負壓，防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。

⑧ 如何對細胞培養進行快速正確的檢測

可用直接培養法檢測細胞培養箱內的支原體污染。
培養基準備： 基本配方為Difco PPLO broth（60%），馬血清（20%），15%酵母膏溶液（10%），10x儲存液（10%）。由於培養時間長，可加50u/ml青黴素至10x儲存液 或加入乙酸鉈（1：2000）至培養基中以防止其他細菌的污染。 10x儲存液（1升）： 稱取50克葡萄糖，10克L-鹽酸精氨酸溶於1升蒸餾水中。用0.22μm無菌過濾膜過濾除菌，分裝100ml至瓶中，-70℃保存。 液體培養基（1升）： 稱取21克Difco PPLO broth，0.02克酚紅於600ml蒸餾水中加熱攪拌溶解。滅菌121℃15分鍾滅菌。待溫度降低至室溫後於無菌操作台內加入200ml馬血 清，100ml 15%酵母膏溶液及100ml解凍的10x儲存液，混合均勻後分裝至已滅菌的有蓋螺旋試管中，10ml/管。4℃保存，保存期限為1個月。 固體培養基： 稱取21克Difco PPLO broth，0.02克酚紅，15克Bacto agar於600ml蒸餾水中，加熱溶解。121℃15分鍾滅菌，放入50℃水浴中，待溫度降至50℃時於無菌超凈台內加入200ml馬血清，100ml 15%酵母膏溶液及解凍的10x儲存液，混合均勻後倒入60x15mm無菌培養皿中，5ml/皿。保存於4℃，期限為1個月。 步驟：取1ml細胞培養液或0.2ml細胞懸浮液接種於液體培養基中，置於37℃培養2周，觀察是否有渾濁或pH變化。培養一 周及兩周後，分別取0.1ml液體培養液塗於瓊脂平板上，倒置於厭氧缸中，37℃培養至少3周，持續觀察是否有支原體菌落出現。另取1ml細胞培養液或 0.2ml細胞懸浮液塗於瓊脂平板上，37℃厭氧培養3周，持續觀察是否有支原體菌落出現。另作正負對照組，正對照為Acholeplasma laidlawii（ATCC 23206）與M. arginini（ATCC 23838）。負對照組為待測細胞的新鮮培養液。 結果判斷：支原體生長較慢，所以先在液體培養基中培養1-2周增殖後再培養於瓊脂平板上，至少培養3周後才能斷定是否有支原體 污染。所以總個測試要5周才知道正確結果。典型的支原體菌落是荷包蛋形，是由於支原體網瓊脂下層生長所致，為無色透明菌落，大小約為10-55μm 。但是並非所有支原體都是荷包蛋菌落，有些是圓形或類似黏菌類形態。區分細胞或是氣泡造成的類似菌落，可將其自瓊脂平板上切下，重新培養於液體培養基中， 培養一周後再接種入瓊脂平板，細胞和菌落則不會生長。

⑨ 細胞培養基的保存應該注意什麼

細胞培養基的保存1.乾粉，買了後一定要保存在4度。有人保存在-20度我認為沒有必要。但4度是非常必要的。保證期是有提示的。2.配好的無血清培養基一定保存在4度，保存不要超過3個月。用時根據提示要加入谷胺醯胺。3.加入血清的培養基，最好保存在4度不要超過1個月，從時間太長，活性下降。當然稍微長點也不一定出問題。但是根據細胞而定;如果原代培養，最好新鮮，如果是腫瘤細胞，或僅維持傳代就不太要緊。但是原則是越新越好。 可以到生物幫那裡查找這樣的信息啊，那裡實驗技術方法與技巧等都是蠻豐富的。