① 如何配DMEM培養基
這里是一份GIBCO的低糖DMEM粉劑配製說明(普通高糖的DMEM培養基配法是一樣的):
TO PREPARE 1*LIQUID
1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.
2. Add powdered medium to 15 to 30℃ (room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)
3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.
4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)
6. Adjust pH of medium to 0.20.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjuste keep container closed until medium is filtered.
7. Sterilize immediately by membrane filtration. (Positive pressure recommended) *pH unite will usually rise 0.1-0.3upon filtration.
另外,在李玲、李雪峰編著的《細胞生物學實驗》中配製方法如下:
1 制備新鮮三蒸水或Millipore超純水。
2 稱取所需量的乾粉培養基,加入約終體積一半的三蒸水中;若配製一個包裝的培養液,在將整個包裝的乾粉倒入三蒸水後,需用水洗包裝袋內面2次,倒入培養液中,以保證所有乾粉都溶解成培養液。磁力攪拌或人工攪拌使之完全溶解。
3 根據包裝袋上的要求補加所需量的碳酸氫鈉;根據實驗需要,添HEPES(5-20mmol/L)、谷氨醯胺和其他特殊物質。
4 加水定容到終體積。
5 必要時用1 mol/L 鹽酸和1 mol/L 氫氧化鈉調節pH。
6 用無菌0.22um濾膜過濾除菌,分裝於無菌血清瓶中,4℃冰箱保存。 配製好的培養液用前加入100U/mL青黴素和100U/mL鏈黴素,並根據需要加入血清(5%-20%)。
② DMEM培養基的高糖與低糖有哪些區別
1、用途不同:低糖DMEM用於養幹細胞可防分化,高糖DMEM可以養大多數哺乳動物的細胞。
2、適用性不同:高糖DMEM 適於培養代謝旺盛的細胞,而低糖適於培養一般代謝水平的細胞。代謝活躍的細胞,如ES,低糖培養基不能提供足夠的碳源。
3、性質不同:低糖的酵母適合在7%以下的糖濃度中生存,而高糖的酵母適合在7%以上糖濃度中生存。
(2)dmem培養基有效期擴展閱讀:
注意事項:
所有的液體及乾粉培養基應在2~8℃避光保存,並在有效期內使用。
不建議配製培養基濃縮液,部分氨基酸或鹽會在高濃度下不溶解或沉澱。
液體培養基的pH 儲存時會因為二氧化碳的逃逸而發生改變,建議盡量減少開瓶次數。
滅菌後的液體培養基添加物應無菌並在無菌操作下添加。
乾粉培養基吸濕性強,極易吸水變質。粉包打開後應全部使用或剩餘舍棄。
③ 什麼是DMEM培養基
DMEM/F12培養基說明書
產品代號:MD207-050
一.【組成成分】
成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L
無水氯化鈣 116.6 L-亮氨酸 59.05 亞油酸 0.042
五水硫酸銅 0.0013 L-賴氨酸鹽酸鹽 91.25 硫辛酸 0.105
九水硝酸鐵 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚紅 8.1
七水硫酸亞鐵 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二鹽酸鹽 0.081
氯化鉀 311.8 L-絲氨酸 26.25 丙酮酸鈉 55
氯化鎂 28.64 L-蘇氨酸 53.45 維生素H 0.0035
無水硫酸鎂 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸鈣 2.24
氯化鈉 6999.5 L-天門冬醯胺 7.5 氯化膽鹼 8.98
無水磷酸二氫鈉 54.35 L-天門冬氨酸 6.65 葉酸 2.65
磷酸氫二鈉 71.02 L-半胱氨酸鹽酸鹽 17.56 i-肌醇 12.6
七水硫酸鋅 0.432 L-谷氨酸 7.35 煙醯胺 2.02
L-精氨酸鹽酸鹽 147.5 L-脯氨酸 17.25 鹽酸吡哆醛 2
L-胱氨酸鹽酸鹽 31.29 L-色氨酸 9.02 鹽酸吡哆醇 0.031
L-谷氨醯胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黃素 0.219
甘氨酸 18.75 L-纈氨酸 52.85 鹽酸硫胺 2.17
L-組氨酸鹽酸鹽 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365
L-異亮氨酸 54.47 次黃嘌呤 2 維生素B12 0.68
二.【產品指標】
外觀 粉紅色固體粉末
溶解性 完全溶解,溶液澄明。
pH值
①加NaHCO3 6.60~7.20
②不加NaHCO3 5.50~6.10
水分(%) ≤5.0
滲透壓(mOsm/kgH2O)
①加NaHCO3 274~302
②不加NaHCO3 238~263
細菌內毒素(EU/ml) ≤10
微生物檢查(CFU/g) ≤1000
細胞生長試驗 細胞形態 與標准細胞形態相似
細胞數量 加10%小牛血清培養4天,細胞密度從104細胞/ml增加到105細胞/ml。
三.【配製方法】
⑴ 將一袋培養基全部倒入一容器中,用少量注射用水將袋內殘留培養基洗下,並入容器。加註射用水(水溫20℃~30℃)到950毫升,輕微攪拌溶解。
⑵ 加入2.438克碳酸氫鈉。
⑶ 輕微攪拌溶解,加註射用水至1升。
⑷ 用1mol / L 氫氧化鈉溶液或 1mol / L鹽酸溶液調pH至所需值。
⑸ 用0.2μm濾膜正壓過濾除菌。
⑹ 溶液應在2℃-8℃下避光保存。
四.【貯藏】 2℃-8℃冷藏,乾燥、密封、避光貯藏。
④ DMEM培養基
索萊寶有賣DMEM培養基的,據了解還不錯,以下是DMEM培養基的介紹
DMEM培養基成分
成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L
無水氯化鈣 116.6 L-亮氨酸 59.05 亞油酸 0.042
五水硫酸銅 0.0013 L-賴氨酸鹽酸鹽 91.25 硫辛酸 0.105
九水硝酸鐵 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚紅 8.1
七水硫酸亞鐵 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二鹽酸鹽 0.081
氯化鉀 311.8 L-絲氨酸 26.25 丙酮酸鈉 55
氯化鎂 28.64 L-蘇氨酸 53.45 維生素H 0.0035
無水硫酸鎂 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸鈣 2.24
氯化鈉 6999.5 L-天門冬醯胺 7.5 氯化膽鹼 8.98
無水磷酸二氫鈉 54.35 L-天門冬氨酸 6.65 葉酸 2.65
磷酸氫二鈉 71.02 L-半胱氨酸鹽酸鹽 17.56 i-肌醇 12.6
七水硫酸鋅 0.432 L-谷氨酸 7.35 煙醯胺 2.02
L-精氨酸鹽酸鹽 147.5 L-脯氨酸 17.25 鹽酸吡哆醛 2
L-胱氨酸鹽酸鹽 31.29 L-色氨酸 9.02 鹽酸吡哆醇 0.031
L-谷氨醯胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黃素 0.219
甘氨酸 18.75 L-纈氨酸 52.85 鹽酸硫胺 2.17
L-組氨酸鹽酸鹽 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365
L-異亮氨酸 54.47 次黃嘌呤 2 維生素B12 0.68
DMEM培養基配製方法
⑴ 將一袋培養基全部倒入一容器中,用少量注射用水將袋內殘留培養基洗下,並入容器.加註射用水(水溫20℃~30℃)到950毫升,輕微攪拌溶解.
⑵ 加入2.438克碳酸氫鈉.
⑶ 輕微攪拌溶解,加註射用水至1升.
⑷ 用1mol / L 氫氧化鈉溶液或 1mol / L鹽酸溶液調pH至所需值.
⑸ 用0.2μm濾膜正壓過濾除菌.
⑹ 溶液應在2℃-8℃下避光保存.
⑤ 關於細胞培養基DMEM的問題請問DMEM中
DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基,是在MEM培養基的基礎上研製的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(低於4500mg/L)和低糖型(低於1000mg/L)。高糖型有利於細胞停泊於一個位置生長,適於生長較快、附著較困難腫瘤細胞等。
⑥ dmem乾粉培養基過期的話還能用么
可以使用的,不過要補加L-谷氨醯胺。
⑦ 培養基配製後一般保存多少時間
根據培養基的儲存條件可以保存超出其外包裝上的保質期,我用過超出一年以上的,沒有問題。但一定要確保無菌,一般乾粉要穩定一些,配成液體的則一年內用完。1640培養基長期不用要保存於-20攝氏度,DMEM不能冷凍,只能冷藏。
⑧ 簡介1640和DMEM培養基的區別
1640培養基和DMEM培養基在組分和用途上有區別,主要是組分上的區別,查回各自的配方表可知。用答途上這兩種培養基應用都很廣泛,且都適合很多種細胞的培養。
RPMI 1640主要用於懸浮細胞培養。可適用於哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養。其它像K-562、HL-60、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。
DMEM適用於貼壁細胞生長,如各種實體瘤貼壁細胞。
要選用哪種培養基,建議先查查參考文獻,也可ATCC上查一下細胞介紹,或買細胞株時咨詢,最好自己摸索,選出更適合的。
厚百holdbio提供細胞培養基,血清等實驗室試劑、耗材及實驗技術服務,科研整體服務(課題設計-實驗-SCI)。
⑨ dmem液體培養基常溫下會變質嗎
dmem液體培養基如果在運輸過程
常溫
2天左右不會有太大的影響
但是最好不要長期放置在室溫條件下,
DMEM培養基的儲存條件為2-8°c。
⑩ DMEM培養基可以凍存嗎
DMEM培養基可以放到4℃冰箱中1個月左右 ,但是要避光,但用前最好加谷氨醯胺0.3g/L
如果時間長的話也可以放到-20℃中,解凍後加谷氨醯胺0.3g/L,本人用這種方法沒有發現對細胞有任何副作用
但是凍存解凍後會有少許沉澱,