『壹』 分析純硝酸鉀和氯化銨等試劑的有效期一般為多少年
我也從來沒在標簽上看到葯品的保質期。一般至多隻看到了葯品的保存條件。
如同分析專純硝酸鉀和氯化屬銨，只需避光乾燥陰涼保存即可。如果你看到這兩種葯品有明顯的吸潮或變色的情況出現，也只需要重結晶即可使用。我們有的放了幾年了也是這樣處理。放心使用，不然就扔掉。沒有保質期。
如果是其他葯品，則根據葯品的性質保存。容易變質的可放冰箱里（實驗室的冰箱，不要和食品混放了）。如果發現有部分變質，固體的就重結晶液體就蒸餾，都不存在保質期的問題。
『貳』 ELISA的原理
Elisa Kit使用方法（以人IL-4 ELISA KIT為例）：
檢測原理:
本實驗採用雙抗體夾心ELISA法。抗人IL-4單抗包被於酶標板上，標本和標准品中的IL-4會 與單抗結合，游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人IL-4抗體和辣根過氧化物酶標記的親 和素。生物素與親和素特異性結合；抗人IL-4抗體與結合在單抗上的人IL-4結合而形成免疫 復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物，若反應孔中有IL-4，辣根過氧化物酶會使無色 的顯色劑現藍色，加終止液變黃。在450nm處測OD值，IL-4濃度與OD450值之間呈正比，可 通過繪制標准曲線求出標本中IL-4的濃度。
試劑盒組成：
1．抗體預包被酶標板（8×12 或 8×6）
2．凍干標准品（2 / 1 支；0.5ng/支）
3．標准品和標本稀釋液（橙蓋瓶）（1 瓶；20ml/12ml）
4．濃縮生物素化抗體（紫蓋瓶）（1 支）
5．生物素化抗體稀釋液（藍蓋瓶）（1 瓶；16ml/10ml）
6．濃縮酶結合物（棕蓋瓶）（1 支）
7．酶結合物稀釋液（紫蓋瓶）（1 瓶；16ml/10ml）
8．濃縮洗滌液 20× （白蓋瓶）（1 瓶；50ml/25ml）
9．顯色底物（TMB）（棕蓋瓶）（1 瓶；12ml/6ml）
10．反應終止液（紅蓋瓶）（1 瓶；12ml/6ml）
11．封板膠紙（6/3 張）
12．產品說明書（1 份）
標本收集:
1. 收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內毒素試管。
2. 血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血，高血脂標本。
3. 標本應清澈透明，懸浮物應離心去除。
4. 標本收集後若不及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存於-20℃，-70℃電冰箱內，避免反復凍融，3-6月內檢測。
5. 如果您的樣本中檢測物濃度高於標准品最高值，請根據實際情況，做適當倍數稀釋(建 議做預實驗，以確定稀釋倍數)。
注意事項:
1. 試劑盒使用前請保存在2-8℃。復溶後的標准品應分裝後，將其放在-20～-70℃貯存。
2. 濃縮生物素化抗體，濃縮酶結合物體積小，運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁 或瓶蓋。因此使用前請用手甩幾下或1000轉/分離心1分鍾，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。取用前，請用移液器小心吹打4-5次使溶液混勻。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬於正常現象，微加熱至40℃使結晶完全溶解後 再配製洗滌液。（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應為室溫。
4. 若需要分次使用標准品應按照每一次用量分裝，將其放在-20～-70℃貯存。避免反復凍 融。
5. 不同批號的試劑盒組份不能混用（洗滌液和反應終止液除外）。
6. 充分輕微混勻對反應結果尤為重要，最好使用微量振盪器(使用最低頻率)，如無微量振盪器，可在反應前手工輕輕敲擊酶標板框混勻。
7. 在試驗中標准品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
8. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴禁在不同的液體之間混用！否則將影響試 驗結果。
9. 試驗中請穿著試驗服並帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時， 請按國家生物試驗室安全防護條列執行。
檢測前准備工作:
1. 請提前20分鍾從冰箱中取出試劑盒，以平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:20)。未用完的放回4℃。
3. 標准品: 加入標准品/標本稀釋液0.5ml至凍干標准品中，靜置15分鍾，待其充分溶解後，輕輕混勻(濃度為1000 pg/ml)。然後根據需要進行稀釋。(建議標准曲線使用以下濃度： 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0 pg/ml)。復溶標准品原液（1000 pg/ml）若未用完請分裝後放入-20℃以下電冰箱內保存，保存兩個月。已稀釋的標准品請廢棄。
4. 生物素化抗體工作液：按當次試驗所需要得用量，使用前20分鍾，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:30)成工作濃度。當日使用。若實驗次數過多導致生物素化 抗體量不足，可向我們公司單獨購買生物素化抗體。（須提供抗體批號）
5. 酶結合物工作液：按當次試驗所需要得用量，使用前20分鍾，以酶結合物稀釋液稀釋濃 縮酶結合物(1:30) 成工作濃度。當日使用。若實驗次數過多導致濃縮酶結合物量不足， 可向我們公司單獨購買濃縮酶結合物。（須提供酶結合物批號）
洗滌方法:
1. 自動洗板機：要求注入的洗滌液為350ul，注入與吸出間隔15－30秒。洗板5次。
2. 手工洗板：甩盡孔內液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350ul，靜置30秒後甩盡液體，在厚迭吸水紙上拍干。洗板5次。
操作步驟:
1．從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需板條，未用的板條和乾燥劑請放回鋁箔袋內壓 實自封條，密封口袋，放回4℃。
2．空白孔加標准品和標本稀釋液，其餘相應孔中加標本或不同濃度標准品(100ul/孔)，用封板膠紙封住反應孔，36℃孵箱孵育90分鍾。
3．提前20分鍾准備生物素化抗體工作液。
4．洗板5次。
5．空白孔加生物素化抗體稀釋液，其餘孔加入生物素化抗體工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應孔，36℃孵箱孵育60分鍾。
6．提前20分鍾准備酶結合物工作液。避光室溫(22-25 ) ℃ 放置。
7．洗板5次。
8．空白孔加酶結合物稀釋液，其餘孔加入酶結合物工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應孔，36℃孵箱，避光孵育30分鍾。
9．打開酶標儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。
10．洗板5次。
11．加入顯色底物(TMB)100ul/孔，避光36℃孵箱，避光孵育15分鍾。
12．加入終止液100ul/孔, 混勻後即刻測量OD450值(3分鍾內)。在儀器保存讀數結果並列印一份紙質結果。
13．實驗完畢後將未用完的試劑按規定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結束。
建議保存酶標板框，以備下次或者今後試驗使用。
結果判斷:
1. 每個標准品和標本的OD值應減去空白孔的OD值。
2. 手工繪制標准曲線。以標准品濃度作橫坐標，OD值作縱坐標，以平滑線連接各標准品的坐標點。通過標本的OD值可在標准曲線上查出其濃度。
3. 若標本OD值高於標准曲線上限，應適當稀釋後重測，計算濃度時應乘以稀釋倍數。
靈敏度、特異性和重復性:
● 靈敏度：最小可測人IL-4達7pg/ml。
● 特異性：不與IL－1,2,3,5,6,8,10,12,IFN,TNF及sTNF-RII等反應。
● 重復性：板內，板間變異系數均<10%。
IL-4簡介：
IL-4是一種由活化的T細胞產生的細胞因子，以往稱為B細胞生長因子1。在B細胞生長的早期活化B細胞，並使被抗原、抗IgM或脂多糖活化的B細胞進入細胞周期G1期。IL-4增強MHCII類抗原的表達和CD23（FceRII）在B細胞上的表達，誘導同種型（isotype）轉換，如促使小鼠B細胞從分泌IgM、IgG3、 IgG2b轉變成分泌IgG1、IgG2a、IgA和IgE。也增強單個核吞噬細胞表達MHCII類抗原，但對炎症性細胞因子（如IL-1,TNF,IL-8）的釋放和這些細胞的殺菌活性有抑製作用。IL-4 也活化細胞毒性 T細胞，它被認為是典型的由TH2細胞產生的細胞因子，對於T,B淋巴細胞的發育以及驅動體液免疫反應和抗體產生都是十分重要的。
『叄』 請問鈣標准溶液和磷標准液的有效期是多久
都是不是學化驗的?!怎抄么都胡說呢?不是誤人子弟嗎? 標准溶液的保質期(准確濃度)不超過兩個月!!!!! 為了保證溶液濃度和化驗的准確性,用來標定EDTA的鈣標准液和做磷標准曲線的磷標准液,我們都是用基準物質現用現配的! 順便說一下,我們一般一個月標定一次EDTA標准溶液的濃度和磷標准曲線.
『肆』 氨氮測試哈希DR3900如何繪制標准曲線
那是要用標液校準的，常見的就是幾個典型的點放置對應標液，標液很貴，有效期很短，最簡單的辦法還是寄給哈希售後讓他們處理。
『伍』 怎麼樣正確的進行ELISA試劑盒的檢測
最全的ELISA試劑盒說明書在這里（通用版）
規格：96T 48T
用途：科研實驗（僅供實驗室研究使用）
保存：2-8℃。
有效期：6個月
結合物的制備
1. 戊二醛交聯法
戊二醛是一種雙功能團試劑，它可以使酶與蛋白質的氨基通過它而聯結。鹼性磷酸一般用此法進行標記。交聯方法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接加入酶與抗體的混合物中，反應後即得酶標記抗體。
ELISA中常用的酶一般都用此法交聯。它具有操作簡便、有效和重復性好等優點。缺點是交聯反應是隨機的，酶與抗體交聯時分子間的比例不嚴格，結合物的大小也不均一，酶與酶，抗體與抗體之間也有可能交聯，影響效果。在兩步法中，先將酶與戊二醛作用，透析除去多餘的戊二醛後，再與抗體作用而形成酶標抗體。也可先將抗體與戊二醛作用，再與酶聯結。兩步法的產物中絕大部分的酶與蛋白質是以1:1的比例結合的，較一步法的酶結合物更有助於本底的改善以提高敏感度，但其偶聯的有效率較一步法低。
2. 過碘酸鹽氧化法：本法只適用於含糖量較高的酶。辣根過氧化物酶的標記常用此法。反應時，過碘酸鈉將HRP分子表面的多糖氧化為醛基很活潑，可與蛋白質上的氨基形成Schiff氏鹼而結合。酶標記物按克分子比例聯結，其最佳比例為：酶/抗體=1-2/1。此法簡便有效，一般認為是HRP最可取的標記方法，但也有人認為所有試劑較為強烈，各批實驗結果不易重演。
按以上方法制備的酶結合物一般都混有未結合物的酶和抗體。理論上，結合物中混有的游離酶一般不影響ELISA中最後的酶活性測定，因經過徹底洗滌，游離酶可被除去，並不影響最終的顯色。但游離的抗體則不同，它會與酶標抗體競爭相應的固相抗原，從而減少了結合到固相上的酶標抗體的量。因此制備的酶結合物應予純化，去除游離的酶和抗體後用於檢測，效果更好。純化的方法很多，分離大分子化合物的方法均可應用。硫酸銨鹽析法最為簡便，但效果並不理想，因為此法只能去除留在上清中的游離酶，但相當數量的游離抗體仍與酶結合物一起沉澱而不能分開。用離子交換層析或分子篩分離更為可取，高效液相層析法可將制備的結合物清晰地分成三個部分：游離酶、游離抗體和純結合物而取得最佳的分離效果，但費用較貴。
結合物製得後，在用作ELISA試劑前尚需確定其適當的工作濃度。使用過濃的結合物，既不經濟，又可使本底增高；結合物的濃度過低，則又影響檢測的敏感性。所以必須對結合物的濃度予以選擇。最適的工作濃度就是指結合物稀釋至這一濃度時，能維護一個低的本底，並獲得測定的最佳靈敏度，達到最合適的測定條件和測定費用的節省。就酶標抗體本身而言，它的有效工作濃度是指與其相應抗原包被的載體作試驗時，能得到陽性反應的最高稀釋度。例如某一HRP：抗人IgG制劑標明的工作濃度為1:5000，表示該制劑經1:5000稀釋後，在與人IgG包被的固相作ELISA試驗時，將發生陽性反應。但在用於具體的ELISA檢測中，酶標抗體的最適工作濃度受到固相載體的性質、包被抗原或抗體的純度以及整個檢測系統如標本、反應溫度和時間等的影響，因此必須在實際測定條件下進行"滴配"選擇能達到高敏感度的最大稀釋度作為試劑盒中的工作濃度。
結合物的保存
酶標抗體中的酶和抗體均為生物活性物質，保存不當，極易失活。高濃度的結合物較為穩定，冰凍乾燥後可在普通冰箱中保存一年左右，但凍干過程中引起活力的減低，而且使用時需經復溶，頗為不便。結合物溶液中加入等體積的甘油可在低溫冰箱或普通冰箱的冰格中較長時間保存。早期的ELISA試劑盒中的結合物一般均按以上兩種形式供應，配以稀釋液（見3.2.5）臨用時按標明的稀釋度稀釋成工作液。現在較先進的ELISA試劑盒均已用合適的緩沖液配成工作液，使用時不需再行稀釋，在4-8℃保存期可達6個月。由於蛋白質濃度較低，結合物易失活，需加入蛋白保護劑。另外再加入抗生素（例如慶大黴素）和防腐劑（HRP結合物加硫柳泵，AP結合物可加疊氮鈉），以防止細菌生長。
結合物的稀釋液
用於稀釋高濃度的結合物以配成工作液。為避免結合物在反應中直接吸附在固相載體上，在稀釋緩沖液中常加入高濃度的無關蛋白質（例如1%牛血清白蛋白），通過競爭以抑制結合物的吸附。一般還加入具有抑制蛋白質吸附於塑料表面的非離子型表面活性劑，如吐溫20，0.05%的濃度較為適宜。在間接測定抗體時，血清標本需稀釋後進行測定，也可應用這種稀釋液。
試劑盒組成
標本要求
1. 標本採集後盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放於-20℃保存，但應避免反復凍融
2. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標准品的稀釋：本試劑盒提供原倍標准品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2. 加樣
分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘各步操作相同）、標准孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標准品准確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加於酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震盪混勻，37℃避光顯色15分鍾.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液後15分鍾以內進行。
操作程序總結：
計算
以標准物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標准曲線，根據樣品的OD值由標准曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標准物的濃度與OD值計算出標准曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。
注意事項
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用，酶標包被板開封後如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器，並經常校對其准確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鍾內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標准曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大於標准品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）後再測定，計算時請最後乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為准.
8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
洗滌液
在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水。
酶反應終止液
常用的HRP反應終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的最終體積而異，在板式ELISA中一般採用2mol/L。
陽性對照品和陰性對照品
陽性對照品和陰性對照品是檢驗試驗有效性的控製品，同時也作為判斷結果的對照，因此對照品，特別是陽性對照品的基本組成應盡量與檢測標本的組成相一致。以人血清為標本的測定，對照品最好也為人血清，因為正常人血清在各種ELISA模式中可產生不同程度的本底。由於大量正常人血甭較難得到，國外試劑盒中的對照品多以復鈣人血漿為原料，即在血漿中加入鈣離子，使其中的纖維蛋白質凝固，除去凝塊後所得的液體，其組成與血清相似。陰性對照品須先行檢測，確定其中不含待測物質。例如HBsAg檢測的陰性對照品中不可含HBsAg，最好抗HBs也是陰性。陽性對照品多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質，其中加入一定量的待檢物質，此量最好在試劑說明書中標明。加入的量應與試劑的敏感度相稱，在測定中得到的吸光值與受檢標本吸光值比較，可對標本中受檢物質的量有一個粗略的估計。國外檢測HBsAg的ELISA試劑盒檢測敏感度約為0.5ng/ml，陽性對照品中含量約為10ng/ml。在對照品中一般加入抗生素和防腐劑，以利保存。
包被用抗體
包被固相載體的抗體應具有高親和力和高特異性，可取材於抗血清或含單克隆抗體的腹水或培養液。如免疫用抗原中含有雜質（即便是極微量的），在抗血清中將出現雜抗體，必須除去（可用吸收法）後才能用於ELISA，以保證試驗的特異性。抗血清不能直接用於包被，應先提取IgG，通常採用硫酸銨鹽析和Sephadex凝膠過濾法。一般經硫酸銨鹽析粗提的IgG已可用於包被，高度純化的IgG性質不穩定。如需用高親和力的抗體包被以提高試驗的敏感性，則可採用親和層析法以除去抗血清中含量較多的非特異性IgG。腹水中單抗的濃度較高，特異性亦較強，因此不需要作吸收和親和層析處理，一般可將腹水作適當稀釋後直接包被，必要時也可用純化的IgG。應用單抗包被時應注意，一種單抗僅針對一種抗原決定簇，在某些情況下，用多種單抗混合包被，可取得更好的效果。
包被的條件
包被用抗原或抗體的濃度，包被的溫度和時間，包被液的pH等應根據試驗的特點和材料的性質而選定。抗體和蛋白質抗原一般採用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液，也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液後，在4-8℃冰箱中放置過夜，37℃中保溫2小時被認為具有同等的包被效果。包被的最適當濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化，每批材料需通過實驗與酶結合物的濃度協調選定。一般蛋白質的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。
包被的方式
將抗原或抗體固定在過程稱為包被。換言之，包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用於。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。 IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯結多發生在Fc段上，抗體結合點暴露於外，因此抗體的包被一般均採用直接吸附法。蛋白質抗原大多也可採用與抗體相似的方法包被。當抗原決定簇存在於或鄰近於疏水區域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，直接包被效果不佳，可以採用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預包被，其後通過抗原抗體反應使抗原固相化。此間接結合在固相上的抗原遠離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質較多的抗原也可採用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。間接包被的另一優點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至於/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質抗原可採用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合。可將聚苯乙烯板先經紫外線照射，以增加其吸附性能。固相載體先用鹼性蛋白質，如聚賴氨酸、魚精蛋白等作預包被，也可提高核酸的結合力。也可用親和素生物素系統作間接包被，即用親和素先包被載體，然後加入生物素化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用於各種抗原物質的定量測定。
脂類物質無法與固相載體結合，可將其在有機溶劑中溶解後加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹乾，待酒精揮發後，讓脂質自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般採用這種包被方式。
洗板方法：
1. 手工洗板方法：吸去或甩掉酶標板內的液體；在實驗台上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鍾，根據需要，重復此過程數次。
2. 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用後再用到正式實驗過程中。待檢樣本：體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等
『陸』 DNS法測定葡萄糖標准曲線為什麼要加濃硫酸和苯酚，還要不要加DNS試劑。 測定樣品還原糖時加硫酸苯酚
沒有加濃硫酸啊。
10mg/mL標准葡萄糖溶液：
精密稱取無水葡萄糖1.0000置80mL蒸餾水中攪拌溶解，待完全溶解後定容至100mL。標記為10mg/mL的標准葡萄糖溶液，同時標記配製日期，4℃條件下保存。
DNS試劑的配製
稱取3,5-二硝基水楊酸31.50g緩慢加入5000mL蒸餾水中，不斷攪拌，水浴至45℃，逐步加入1000mL氫氧化鈉溶液（e），不斷攪拌至溶液清澈透明（在加入氫氧化鈉溶液過程中，溶液溫度不要超過48℃）。再逐步加入四水酒石酸鉀鈉910.0g、苯酚25.0 g、無水亞硫酸鈉25.0 g，繼續45℃水浴加熱，同時補水3000mL，不斷攪拌，至上述物質完全溶解後，冷卻至室溫，並定容到10000 mL。用濾布過濾，將濾液儲存於棕色瓶中，標識名稱和配製日期，避光，室溫保存7天後可以使用。有效期6個月。
分析步驟：
標准曲線的繪制：
取8支試管按下表加入相關試液後再加入1.5mLDNS試劑,充分搖勻，置沸水浴中反應5min。迅速冷卻至室溫，用水定容至5.0mL，用0號試管試液作對照，在540nm波長下測其它各試管試液的吸光度。以吸光度為縱坐標，以葡萄糖含量為橫坐標繪制標准曲線。
試管號
0
1
2
3
4
5
6
7
緩沖液加入量（μL ）
1000
990
985
980
975
970
965
960
葡萄糖標准液加入量（μL ）
0
10
15
20
25
30
35
40
葡萄糖含量（μg）
0
100
150
200
250
300
350
400
『柒』 亞硝酸鹽氮的標准曲線偏低的原因是什麼可以幫我解答一下嗎急急急
亞硝酸鹽氮的標准曲線偏低的原因是什麼
有效期為兩個月，此溶液1.00mL含100.0 gN。 3.3.2 亞硝酸鹽氮標准—水樣中亞硝酸鹽氮的吸光度； a—標准曲線截距； b—標准曲線斜率。
『捌』 嘔吐毒素半對數標准曲線橫坐標為半對數如何標數值
嘔吐毒素檢測試劑盒
使用說明書
（酶聯免疫法）
1 原理及用途
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇又稱嘔吐毒素素，由禾穀鐮刀菌產生，常出現在玉米（穗腐病）、小麥和大麥（赤霉病）上。我國穀物中DON的限量標准為1.0mg／kg。
本試劑盒採用間接競爭ELISA方法檢測大米、小米、面等穀物及飼料樣本中的嘔吐毒素(Deoxynivalenol，DON)，試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標准品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標准品或樣品溶液，樣本中的嘔吐毒素和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗嘔吐毒素抗體，加入酶標記物後，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含嘔吐毒素含量成負相關，與標准曲線比較即可得出樣本中嘔吐毒素的殘留量。
2 技術指標
2.1 試劑盒靈敏度：3ppb(ng/ml)
2.2 反應模式：37℃，30min～30min～15min
2.3 檢測下限：
穀物、飼料…………………………150ppb
2.4 交叉反應率：
嘔吐毒素……………………………………100%
3-乙醯基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇……………<1%
2.5 樣本回收率：
穀物及配合飼料…………………………85%±15%
3 嘔吐毒素檢測試劑盒組成
酶標板……………………………96孔
標准品（黑蓋）：各1ml
0ppb、3ppb、9ppb、27ppb、81ppb、243ppb
酶標記物（紅蓋）…………………11ml
抗體工作液（藍蓋）………………5.5ml
底物液A（白蓋）……………………6ml
底物液B（黑蓋）……………………6ml
終止液（黃蓋）………………………6ml
20X濃縮洗滌液（白蓋）……………40ml
2X復溶液（黃蓋）…………………50ml
說明書………………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器：酶標儀、列印機、均質器 、振盪器、離心機、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：單道20?l-200?l，100?l-1000?l、多道300?l
5 嘔吐毒素檢測試劑盒樣本前處理
5.1 樣本處理前須知：
實驗器具必須潔凈並使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗結果。
5.2 配液：
配液1：復溶液
將2×復溶液用去離子水2倍稀釋，用於樣本的復溶，復溶液在4℃環境可保存一個月。
5.3 樣本前處理步驟：
5.3.1 穀物（大米、玉米、小米等）及飼料處理方法
1）稱取2g粉碎樣品於50ml離心管中，加10ml去離子水，振盪5分鍾，室溫4000轉/分離心10分鍾；
2）取0.1ml上清，加入0.9ml復溶液，混勻；
3）取50μl進行分析。
樣本稀釋倍數：50 檢測下限：150ppb
6 酶聯免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置於室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存於2-8℃。
實驗開始前，用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
6.1 編 號：將樣本和標准品對應微孔按序編號，每個樣本和標准品做2孔平行，並記錄標准孔和樣本孔所在的位置。
6.2 加樣反應：加標准品應用液或樣本50?l/孔到各自的微孔中，然後加抗體工作液50?l/孔，輕輕振盪5秒混勻，37℃避光反應30分鍾。
6.3 洗 滌：將孔內液體甩干，用工作洗滌液250?l/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，最後用吸水紙拍干（拍干後未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
6.4 加酶反應：加酶標記物100?l/孔，37℃避光反應30分鍾。
6.5 洗 滌：同上
6.6 顯 色：加底物液A 50?l/孔，再加底物液B 50?l/孔，輕輕振盪5秒混勻，37℃避光顯色15分鍾。
6.7 終 止：加終止液50?l/孔，輕輕振盪混勻，終止反應。
6.8 測吸光值：用酶標儀於450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應在終止反應後10分鍾內完成。
7 結果分析
7.1 百分吸光率的計算
標准液或樣本的百分吸光率等於標准液或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以第一個標准液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即
百分吸光度值（%）＝
A
×100%
A0
A—標准溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標准溶液的平均吸光度值
7.2 標准曲線的繪制與計算
以標准液百分吸光率為縱坐標，對應的標准液濃度（ppb）的對數為橫坐標，繪制標准液的半對數曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標准曲線中，從標准曲線上讀出樣本所對應的濃度，乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中待測物的實際濃度。
若利用試劑盒專業分析軟體進行計算，更便於大量樣本的准確、快速分析。（歡迎來電索取）
8 注意事項
8.1 室溫低於25℃或試劑及樣本沒有回到室溫（25℃）會導致所有標準的OD值偏低。
8.2 在洗板過程中如果出現板孔乾燥的情況，則會出現標准曲線不成線性，重復性不好的現象。所以洗板拍干後應立即進行下一步操作。
8.3 混合要均勻，洗板要徹底，在ELISA分析中的再現性，很大程度上取決於洗板的一致性。
8.4 在所有孵育過程中，用蓋板膜封住微孔板，避免光線照射。
8.5 不要使用過了有效期的試劑盒，不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
8.6 顯色液若有任何顏色表明變質，應當棄之。0標準的吸光度值小於0.5個單位（A450nm< 0.5 ）時，表示試劑可能變質。
8.7 反應終止液有腐蝕性，避免接觸皮膚。
9 貯藏及保存期
儲藏條件：試劑盒於2-8℃保存，避免冷凍。
保 質 期：該產品有效期為1年，生產日期見包裝盒。
『玖』 土壤中的氮磷鉀可以用普通的分光光度計測嗎
僅磷可以
土壤鹼解氮的測定
一、目的和要求
掌握擴散法測定土壤鹼解氮的方法。
二、內容與原理
土壤水解性氮或稱鹼解氮包括無機態氮(銨態氮、硝態氮)及易水解的有機態氮(氨基酸、醯銨和易水解蛋白質)。用鹼液處理土壤時，易水解的有機氮及銨態氮轉化為氨，硝態氮則先經硫酸亞鐵轉化為銨。以硼酸吸收氨，再用標准酸滴定，計算水解性氮含量。
三、主要儀器及試劑配製
主要儀器：電子天平、擴散皿、毛玻璃、恆溫箱、半微量滴定管(5毫升)
試劑：
(1)1.07molL-1Na0H：稱取42.8克NaOH溶於水中，冷卻後稀釋至1升。
(2)2％H3BO3指示劑溶液：稱取H3BO3 20克加水900毫升，稍稍加熱溶解，冷卻後，加入混合指示劑20毫升(0.099克溴甲酚綠和0.066克甲基紅溶於100毫升乙醇中)。然後以0.1m0lL-1NaOH調節溶液至紅紫色(pH約為5)最後加水稀釋至1000毫升，混合均勻貯於瓶中。
(3)0.005molL-1H2SO4標准液：取濃H2S04 1.42毫升，加蒸餾水5000毫升，然後用標准鹼或硼砂(Na2B407•10H2O)標定之。
(4)鹼性甘油：加40克阿拉伯膠和50毫升水於燒杯中，溫熱至70—— 80℃攪拌促溶，冷卻約1小時，加入20毫升甘油和30毫升飽和K2CO3水溶液，攪勻放冷，離心除去泡沫及不溶物，將清液貯於玻璃瓶中備用。 （5）硫酸亞鐵粉：FeSO4.7H2O(三級)磨細，裝入玻璃瓶中，存於陰涼處。
四、操作方法與實驗步驟
1、稱取通過1毫米篩的風干土樣2克(精確到0.01克)和硫酸亞鐵粉劑0.2克均勻鋪在擴散皿外室，水平地輕輕旋轉擴散皿，使土樣鋪平。
2、在擴散皿的內室中，加入2毫升2％含指示劑的硼酸溶液，然後在皿的外室邊緣塗上鹼性甘油，蓋上毛玻璃，並旋轉之，使毛玻璃與擴散皿邊緣完全粘合，再慢慢轉開毛玻璃的一邊，使擴散皿露出一條狹縫，迅速加入10毫升1.07molL-1NaOH液於擴散皿的外室中，立即將毛玻璃旋轉蓋嚴，在實驗台上水平地輕輕旋轉擴散皿，使溶液與土壤充分混勻，並用橡皮筋固定；隨後小心放入40℃的恆溫箱中。
3、24小時後取出，用微量滴定管以0.005molL-1的H2SO4標准液滴定擴散皿內室硼酸液吸收的氨量，其終點為紫紅色。
另取一擴散皿，做空白試驗，不加土壤，其他步驟與有土壤的相同。
五、作業
根據下列公式計算土壤中鹼解氮的含量
C×(V-V0) ×14
土壤中水解氮(mgkg-1)＝——-----------------——— ×1000
W
C—— H2S04標准液的濃度
V—— 樣品測定時用去H2S04標准液的體積
V0——空白測定時用去H2S04標准液的體積
14—— 氮的摩爾質量
1000——換算系數
W—— 土壤重量(克)
六、注意事項
在測定過程中鹼的種類和濃度、土液比例、水解的溫度和時間等因素對測得值的高低，都有一定的影響。為了要得到可靠的、能相互比較的結果，必須嚴格按照所規定的條件進行測定。
七、參考指標
土壤水解性氮(mgkg-1)等級
＜25 極低
25—— 30 低
50—— 100 中等
100—— 150 高
土壤中速效磷的測定
了解土壤中速效磷的供應狀況，對於施肥有著直接的指導意義。土壤中速效磷的測定方法很多，由於提取劑的不同所得結果也不一樣。一般情況下，石灰性土壤和中性土壤採用碳酸氫鈉提取，酸性土壤採用酸性氟化銨提取。
（一）碳酸氫鈉法
1、方法原理
中性、石灰性土壤中的速效磷，多以磷酸一鈣和磷酸二鈣狀態存在，用0.5M碳酸氫鈉液可將其提取到溶液中，然後將待測液用鉬銻抗混合顯色劑在常溫下進行還原使黃色的銻磷鉬雜多酸還原成為磷鉬蘭進行比色。
2、操作步驟
稱取通過1毫米篩孔的風干土2.5克（精確到0.01克）於250毫升三角瓶中，加50毫升0.5M NaHCO3液，再加一角匙無磷活性炭，塞緊瓶塞，在20—— 25℃下振盪30分鍾，取出用乾燥漏斗和無磷濾紙過濾於三角瓶中，同時做試劑的空白試驗。吸取濾液10毫升於50毫升量瓶中，用鉬銻抗試劑5毫升顯色，並用蒸餾水定容，搖勻，在室溫高於15℃的條件下放置30分鍾，用紅色濾光片或660nm波長的光進行比色，以空白溶液的透光率為100（即光密度為0），讀出測定液的光密度，在標准曲線上查出顯色液的磷濃度（mgkg-1）。
標准曲線制備：
吸取含磷（P）5mgkg-1的標准溶液0、1、2、3、4、5、6毫升，分別加入50毫升容量瓶中，加0.5M NaHCO3液10毫升，加水至約30毫升，再加入鉬銻抗顯色劑5毫升，搖勻，定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mgkg-1磷標准系列溶液，與待測溶液同時比色，讀取吸收值，在方格座標紙上以吸收值為縱座標，磷mgkg-1數為橫座標，繪製成標准曲線。
1、 結果計算
顯色液磷mgkg-1數×顯色液體積×分取倍數
土壤中速效磷mgkg-1＝—————————————————――――――――—————————
烘乾土重（克）
顯色液磷mgkg-1數：從工作曲線查得顯色液的磷mgkg-1數
顯色液體積：50毫升
浸提液總體積(50毫升)
分取倍數＝————--------—————————
吸取浸出液毫升數
4、主要儀器及試劑配製
儀器：往復式振盪機，分光光度計或光電比色計
試劑：
(1)0.5M NaHCO3浸提劑(pH＝8.5)
稱取42.0克NaHCO3溶於800毫升水中，稀釋至990毫升，用4M NaOH液調節pH至8.5，然後稀釋至1升，保存於瓶中，如超過一個月，使用前應重新校正pH值。
(2)無磷活性炭粉
將活性炭粉用1:1 HCl浸泡過夜，然後用平板漏斗抽氣過濾，用水洗凈，直至無HCl為止，再加0.5M NaHCO3液浸泡過夜，在平板漏鬥上抽氣過濾，用水洗凈NaHCO3，最後檢查至無磷為止，烘乾備用。
(3)鉬銻抗試劑
稱取酒石酸銻鉀(KSbOC4H4O6)0.5克，溶於100毫升水中，製成5％的溶液。
另稱取鉬酸銨20克溶於450毫升水中徐徐加入208.3毫升濃硫酸，邊加邊攪動，再將0.5％的酒石酸銻鉀溶液100毫升加入到鉬酸銨液中，最後加至1升，充分搖勻，貯於棕色瓶中，此為鉬銻混合液。
臨用前(當天)稱取1.5克左旋抗壞血酸溶液於100毫升鉬銻混合液中，混勻。此即鉬銻抗試劑。(有效期24小時，如貯於冰箱中，則有效期較長。)
(4)磷標准溶液
稱取0.439克KH2PO4(105℃烘2小時)溶於200毫升水中，加入5毫升濃H2SO4，轉入1升量瓶中，用水定容，此為100 mgkg-1磷標准液，可較長時間保存。取此溶液稀釋20倍即為5 mgkg-1磷標准液，此液不宜久存。
土壤速效鉀測定
（一）目的與要求 了解土壤速效性鉀的測定原理；初步掌握測定土壤速效性鉀的主要方法和步驟。 （二）主要內容 用火焰光度計法測定土壤速效性鉀。 （三）儀器用品 火焰光度計。分析天平，振盪機； 100mL三角瓶， 1000ml、100ml、50mL容量瓶，20ml,40ml移液管，,10ml吸量管,洗耳球等。 (四）原理方法 鉀是植物生長所需的養分之一、土壤中的擁素可分為四種狀態；土壤中的含鉀礦物（此為難溶性鉀）；非代換性神（為緩效性鉀）；代換性鉀；水溶性鉀（速效性鉀）。植物所能利用的鉀是以水溶性及代換性狀態存在的鉀，其中主要是代換性鉀。因此，測定土壤中代換性鉀才能真實反映土壤中速效鉀的供應情況。
（五）操作步驟 (1)稱土一浸提稱取通過lmm篩孔的風干土樣5g（精確到O.01g，放入100ml三角瓶中，加入50mL 1mol／L中性醋酸銨溶液塞緊橡皮塞。 （2）振盪一過濾將三角瓶固定在振盪機上，振盪約15分鍾；立即過濾；濾液盛於50mL容量瓶中，定容至刻度。 （3）測定將上述容量瓶中的濾液與鉀標准系列溶液一起用火焰光度計測定。在方格紙上繪制標准曲線，然後查出待測液相應的ppm數
『拾』 AFS-640A原子熒光儀，5個標准液檢測完成後在工作曲線界面下不顯示標准曲線圖，怎麼回事請教
可能存在以下幾個問題
1. 標准曲線不出峰：
1.標准溶液的問題
2.檢查儀器運行時反應塊那裡有無氣泡產生（是否有氫氣生成）
3.檢查砷元素燈
4.檢查泵管是否老化
5.修改一下延遲時間和讀數時間
2. 檢查一下點火爐絲是否可以正常點火
3. 最大濃度點也不出峰嗎?可能元素燈出問題了.
4. 我以前也遇到這樣的問題：
你檢查一下氣路是否通，有沒有氬氫火焰，爐絲有沒有損壞，試劑是否在有效期內。蠕動泵有沒有壞，進載流和酸的管子是否一致
5. 檢查水封