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dna凝膠電泳是誰發明的

發布時間:2021-07-14 18:39:13

『壹』 誰能幫我分析一下這個DNA凝膠電泳圖,第一個為marker第二個為植物DNA第三個為大腸桿菌

  1. 沒有明確marker的大小,但是你最下面有一團小的物質,估計為RNA,提取或最後溶解的時候注意加RNA酶;

  2. 植物DNA基本沒有提取到,植物DNA很大,都會在最上面,你提取的質量不好。

  3. 大腸桿菌提取的是質粒還是基因組?結果也不是很好。

『貳』 DNA凝膠電泳產生拖帶的原因是什麼

多數是因為電壓太大,還有可能是制膠有問題。

『叄』 DNA瓊脂糖凝膠電泳分析

你好!可能是DNA提純濃度不夠,所以會出現拖尾,也有可能是配膠濃度不對,比如1.5%的gel你配成1%,也有可能是電泳時間或者電壓、電流調的不對,條帶還沒有跑到指定位置。建議看相關文獻,看別人跑相同的DNA或RNA的條件是什麼,然後再根據自己的實驗進行優化。

『肆』 DNA的電泳技術是怎麼一回事

凝膠電泳是一大類技術,被科學工作者用於分離不同物理性質(如大小、形狀、等電點等)的分子。凝膠電泳通常用於分析用途,但也可以作為制備技術,在採用某些方法(如質譜(MS)、聚合酶鏈式反應(PCR)、克隆技術、DNA測序或者免疫印跡)檢測之前部分提純分子。 該技術操作簡便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度離心法)所無法分離的DNA片段。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶(Ethidium bromide, EB)染色,在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DNA片段在凝膠中的位置。此外,還可以從電泳後的凝膠中回收特定的DNA條帶,用於以後的克隆技術操作。

瓊脂糖和聚丙烯醯胺可以製成各種形狀、大小和孔隙度。瓊脂糖凝膠分離DNA片度大小范圍較廣,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp至近50kb的DNA片段。瓊脂糖通常用水平裝置在強度和方向恆定的電場下電泳。聚丙烯醯胺分離小片段DNA(5-500bp)效果較好,其分辯力極高,甚至相差1bp的DNA片段就能分開。聚丙烯醯胺凝膠電泳很快,可容納相對大量的DNA,但制備和操作比瓊脂糖凝膠困難。聚丙烯醯胺凝膠採用垂直裝置進行電泳。目前,一般實驗室多用瓊脂糖水平平板凝膠電泳裝置進行DNA電泳。

瓊脂糖主要在DNA制備電泳中作為一種固體支持基質,其密度取決於瓊脂糖的濃度。在電場中,在中性pH值下帶負電荷的DNA向陽極遷移,其遷移速率由下列多種因素決定:
1、 DNA的分子大小:
線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難於在凝膠孔隙中蠕行,因而遷移得越慢。
2、 瓊脂糖濃度
一個給定大小的線狀DNA分子,其遷移速度在不同濃度的瓊脂糖凝膠中各不相同。DNA電泳遷移率的對數與凝膠濃度成線性關系。凝膠濃度的選擇取決於DNA分子的大小。分離小於0.5kb的DNA片段所需膠濃度是1.2-1.5%,分離大於10kb的DNA分子所需膠濃度為0.3-0.7%, DNA片段大小間於兩者之間則所需膠濃度為0.8-1.0%。
3、 DNA分子的構象
DNA分子處於不同構象時,它在電場中移動距離不僅和分子量有關,還和它本身構象有關。相同分子量的線狀、開環和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中移動速度是不一樣的,超螺旋DNA移動最快,而線狀雙鏈DNA移動最慢。如在電泳鑒定質粒純度時發現凝膠上有數條DNA帶難以確定是質粒DNA不同構象引起還是因為含有其他DNA引起時,可從瓊脂糖凝膠上將DNA帶逐個回收,用同一種限制性內切酶分別水解,然後電泳,如在凝膠上出現相同的DNA圖譜,則為同一種DNA。

4、 電源電壓

在低電壓時,線狀DNA片段的遷移速率與所加電壓成正比。但是隨著電場強度的增加,不同分子量的DNA片段的遷移率將以不同的幅度增長,片段越大,因場強升高引起的遷移率升高幅度也越大,因此電壓增加,瓊脂糖凝膠的有效分離范圍將縮小。要使大於2kb的DNA片段的解析度達到最大,所加電壓不得超過5v/cm。

5、嵌入染料的存在

熒光染料溴化乙啶用於檢測瓊脂糖凝膠中的DNA,染料會嵌入到堆積的鹼基對之間並拉長線狀和帶缺口的環狀DNA,使其剛性更強,還會使線狀DNA遷移率降低15%。

6、 離子強度影響

電泳緩沖液的組成及其離子強度影響DNA的電泳遷移率。在沒有離子存在時(如誤用蒸餾水配製凝膠),電導率最小,DNA幾乎不移動,在高離子強度的緩沖液中(如誤加10×電泳緩沖液),則電導很高並明顯產熱,嚴重時會引起凝膠熔化或DNA變性。

對於天然的雙鏈DNA,常用的幾種電泳緩沖液有TAE[含EDTA (pH8.0)和Tris-乙酸],TBE(Tris-硼酸和EDTA),TPE(Tris-磷酸和EDTA),一般配製成濃縮母液,儲於室溫。

『伍』 瓊脂糖凝膠電泳是誰發明

其實有很多種瓊脂糖凝膠電泳,發明者也是不同的, 使用最普遍的裝置是Walter Schaffner 發明的水平板凝膠。

Walter Schaffner 這個名字讓多少大學生無限的做著瓊脂糖凝膠電泳……

『陸』 DNA做凝膠電泳使用來干什麼的即有什麼意義

分離鑒定DNA。。不同長度還有不同形態(超螺旋,雙鏈,單鏈,線性等等)的DNA在電場下的泳動速度不一樣。而且凝膠上都是小孔洞。大的不能穿梭就被纏住,泳動慢,小的在裡面穿梭,泳動快,根據這個原理,使用標準的DNA樣品。就可以知道目的DNA的大小,,,進一步可以進行分離純化等。

『柒』 DNA瓊脂糖凝膠電泳

多大濃度的膠?加樣孔在上面還是下面?marker多大,尤其最亮那條帶是多少?另外,marker好像是在最右邊啊。

『捌』 凝膠電泳技術為什麼能分離DNA

你指得應該是瓊脂糖凝膠電泳
DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應和分子篩效應。
DNA分子在高於等電點的pH溶液中帶負電荷,在電場中向正極移動。由於糖-磷酸骨架在結構上的重復性質,相同大小的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷,而不同大小的DNA所具有的凈電荷就不一樣,在同樣電場條件下受力也不一樣。
其次,DNA分子在凝膠中也會受到阻力影響,阻力有DNA的大小和結構決定。大小就是脫氧核糖核苷酸量(或說分子量大小),分子量DNA的一般結構在相同環境下遷移速度關系如下:環狀>雙鏈>環狀開環

『玖』 dna瓊脂糖凝膠電泳

應該是某一種染液。在電泳結束後,和共軛雙鍵結合,顯示DNA條帶的量。
具體的商品名並不了解。

『拾』 有人懂DNA凝膠電泳嗎

DNA 跑電泳一般採用瓊脂糖凝膠電泳法。瓊脂糖凝膠電泳法是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對於分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可採用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。瓊脂糖凝膠具有網路結構,物質分子通過時會受到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大。普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2-20kb。
蛋白質和核酸會根據pH不同帶有不同電荷,在電場中受力大小不同,因此跑的速度不同,根據這個原理可將其分開。電泳緩沖液的pH在6~9之間,離子強度0.02~0.05為最適。常用1%的瓊脂糖作為電泳支持物。瓊脂糖凝膠約可區分相差100bp的DNA片段,其解析度雖比聚丙烯醯胺凝膠低,但它制備容易,分離范圍廣。

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