❶ 吐司怎麼切
今天來說一說我是怎麼做吐司的
配料,高筋麵粉270克,黃油25克,奶粉15克水150克。雞蛋一個,細砂糖40克,乾酵母4克,鹽3克。
烹飪步驟:
1.稱量材料,雞蛋選一個小的。
2.進行第一次攪拌:因為黃油會阻止面團出筋,將除黃油外的所有材料放入麵包桶。液體先放。再放麵粉。奶粉挖三個坑,糖,酵母粉,鹽分別放入,
3.啟動和面程序我用了20分鍾左右,可以適當的延遲五到十分鍾,直到出現。較粗糙的膜進行第二次攪拌。我此時加入室溫軟化的黃油繼續揉面,我用了二兩個20分鍾的揉面程序。出現了比較薄的手摸出現破洞是規則的圓形。即完成了階段。
4.進行第一次發酵,取一片保鮮膜蓋住麵包桶里的面團。能夠保障濕度,啟動麵包機發酵程序。麵包機發酵40分左右,左右狀態用手粘麵粉伸入出面,手指動迅速回收,說明沒有發酵好。繼續發酵25分鍾,深入手指稍微有點。緩慢回縮,這樣子就可以了。我用的時間不一定適合所有人,大家可以根據自己的情況而定。
5.拿出面團揉面排氣一定要排氣徹底,否則烤出來吐司會出現大氣泡五。就是用力捶打排氣後勻成揉成小面團。蓋上保鮮膜再次醒發15分鍾。
6.取一個行好的面團,用擀麵杖擀成長舌狀。然後從一頭捲起來一邊壓著一邊卷一定要卷緊一點,否則吐司麵包會產生大縫隙。
7.將卷好的面團收口朝下放入吐司盒底部。
8.進行第二次發酵,用烤箱進行發酵,烤箱預熱四十五中分鍾,放一盤熱水也保證。發酵的溫度和濕度吐司和蓋上濕布。放入烤箱。
9.放在烤箱里發酵,我用了兩小時左右發酵蓋上吐司蓋預熱烤箱190°。烤箱上下乘45分鍾烤制溫度以及時間根據自己家的情況而定。
❷ 怎麼用胡蘿卜切各種花片
1.
法寶一:黃瓜、胡蘿卜切花裝飾
無論你在什麼地方,黃瓜和胡蘿卜都是隨手可得的材料,
2.
用小刀稍作加工,就可以把它們變成漂亮的擺盤造型,
3.
還能拼成一朵漂亮的蝴蝶花,是萬試萬靈的百搭款式。
4.
5.
法寶二:用番茄、白煮雞蛋、腌黃瓜等切片裝飾
用番茄、白煮雞蛋、獼猴桃、甚至腌黃瓜等都可切片裝飾,而西餐里則往往利用配菜來做裝飾。
6.
法寶三:水果花刀
水果裝盤時也可切成花色刀,例如蘋果花刀
7.
法寶四:雕刻、造型
雕刻造型是比較有難度的技術,一般人都不敢輕易挑戰。不過,也有人發明了一些非常簡單的切割造型技法,就算你是菜鳥也能很快上手哦。下面教大家3種非常簡單的雕刻造型。
8.
第一種:只需幾刀,就能把小番茄變成可愛的兔子
也可以用煮熟的鵪鶉蛋做小白兔,方法一樣。
9.
還可以把葡萄、小番茄等做成一個愛心的形狀先在它大約1/3處起斜切一刀,只留下半部分
10.
切口向下放在案板上,縱切一刀大切口向下平攤,旋轉一下兩片番茄,讓小切口相對就可以了!
❸ 切片機誰發明的
切片機是切制薄而均勻組織片的機械,組織用堅硬的石蠟或其他物質支持,每切一次借切片厚度器自動向前(向刀的方向)推進所需距離,厚度器的梯度通常為1微米。切制石蠟包埋的組織時,由於與前一張切片的蠟邊粘著,而製成多張切片的切片條。 不存在誰發明的。實用的產物!
❹ 有一種發明於東北的用花生和豆子加工製作的菜叫什麼名字
素雞是一種漢族豆制食品,屬閩菜系,是一道福建風味素菜。以素仿葷,口內感與味道與原肉難容以分辨,風味獨特,以豆腐皮作主料,捲成圓棍形,捆緊煮熟,切片過油,加調料炒制而成的佳餚。也可做成魚形、蝦形等其他形狀。這道風味素菜主要口味為咸鮮。
❺ 小學生小發明小創造
1.我們知道通常我們的抽屜里會發現一些舊電池,但是我們也不知道還有沒有電,如果放進用電器來檢驗很麻煩而且無法知道它電剩餘量。所以,你可以做一個小驗電器。
方法簡單如下:使用一個小燈泡,很小的那種(像掛墜或玩具燈上的,五金店都有賣)。然後用兩根細漆包線分別連接燈上。兩根線的另一端分別用於接你要檢驗的電池的正負極。根據小燈泡的亮度,就可以判斷電池的電量了。
2.拿把破雨傘,把布拆掉,拿一條電線,一頭接電視或收音機,一頭接到傘上面,就是一個好好的信號接受器。你想專業一點就在傘上面多繞幾圈鐵絲就行了。這是最省錢,快捷的方法,只是有點搞笑。
3將一根火柴和一根縫被的大針並在一起,用包香煙的鋁箔將它們緊緊地包裹起來,再將有火柴頭的一端的鋁箔彎折過來密封捻緊。然後在靠近尾部的地方裝上定向尾翼,把針拔出,就成了一個很簡單的反沖火箭。
實驗時,把小火箭放在鐵絲架上,點燃一根火柴,對准鋁箔筒包有火柴頭的部位加熱。當溫度升高到火柴頭的燃點時,箔里的火柴匣被點燃,使周圍的空氣急劇膨脹,氣體從尾口高速噴出。由於反沖作用,火箭筒便從架上向前飛了出去。
如果在鋁箔中包兩根頭對頭放置的火柴,兩端都不封閉。將它放在上,從中部加熱。當筒內火柴點燃後,氣體從兩頭噴出,鋁箔筒仍停留在架上,從而說明了系統的動量守恆.
❻ 我看到我愛發明中的土豆切絲切片機非常好,怎麼能聯繫到發明人瓦
馬鈴薯(學名:Solanum tuberosum),屬茄科多年生草本植物,塊莖可供食用,是全球第四大重內要的糧食作物,僅次於小容麥、稻穀和玉米。馬鈴薯又稱地蛋、土豆 、洋山芋等,茄科植物的塊莖。與小麥、稻穀、玉米、高粱並成為世界五大作物。
馬鈴薯原產於南美洲安第斯山區,人工栽培歷史最早可追溯到大約公元前8000年到5000年的秘魯南部地區。
馬鈴薯主要生產國有中國、俄羅斯、印度、烏克蘭、美國等。中國是世界馬鈴薯總產最多的國家。
2015年,中國將啟動馬鈴薯主糧化戰略,推進把馬鈴薯加工成饅頭、面條、米粉等主食,馬鈴薯將成稻米、小麥 、玉米外的又一主糧。
❼ 做科研觀察植物切片用什麼顯微鏡最好
顯微鏡是由一個透鏡或幾個透鏡的組合構成的一種光學儀器,是人類進入原子時代的標志。主要用於放大微小物體成為人的肉眼所能看到的儀器。顯微鏡分光學顯微鏡和電子顯微鏡:光學顯微鏡是在1590年由荷蘭的詹森父子所首創。現在的光學顯微鏡可把物體放大1600倍,分辨的最小極限達0.1微米,國內顯微鏡機械筒長度一般是160mm。其中對顯微鏡研製,微生物學有巨大貢獻的人為列文虎克,荷蘭籍。
顯微鏡是人類這個時期最偉大的發明物之一。在它發明出來之前,人類關於周圍世界的觀念局限在用肉眼,或者靠手持透鏡幫助肉眼所看到的東西。
顯微鏡把一個全新的世界展現在人類的視野里。希望能幫到你。
❽ 求地理和生物小發明,要簡單
截止到乒乓球。繪制的經度和緯度線。
一個自製
指南針,指南針是中國古代的四大發明之一。在日常生活中使用它,它是基於磁生產的原則。
膠合板,看見一個直徑為120毫米地板。用砂紙打磨表面和邊緣。手繪紙的鉛標志著一個很好的象徵,切成一定尺寸,安裝在機箱的磁碟,一針針或通過從機箱的背面中心,尖露出磁碟軸。據的大小的一種白色金屬指針形狀切割,鑽的孔的直徑為2毫米,固定在指針上的硬幣。觸摸指針數次與一個永久磁鐵,從而使指示器磁化。最後,在該軸上的指針。需要注意的是頭指向北方,這頭塗成紅色。
小發明:自製魚缸清潔
馴化幾個可愛的小金魚,為大家增添了不少的樂趣。這幫小傢伙排泄是非常強的,只是改變了水,很快,這是它們的糞便污染很不雅觀。教師在課堂上的氣動,雙用抽氣泵進行的演示實驗,如果我們能夠產生類似的兩用泵工具,先抽受污染的水,過濾,然後發回給魚缸的清潔工具,這樣既做不換水,但也清潔氣缸污染物,那該多好啊!為此,我模仿的原則使用雙泵設計製作了一個魚缸清潔器,如圖所示。
魚缸清潔器工作原理是這樣的:進入水箱的清潔,拉活塞,進水閥打開頂蓋排水球閥被迫關閉,金魚糞便的水抽入桶;推活塞強大的壓力桶外的氣缸壓力,被迫關閉進水閥,排水球閥頂開,水的壓力後的魚缸過濾器,過濾器,過濾掉的污物。因此,經過幾推挽坦克清除的糞便。
魚缸清潔器簡單實用,效果良好。該材料可適應當地的條件,大小根據魚缸的大小。但重要的是要注意兩點:1,球閥的閥,活塞和抽水簡單地局限,否則抽水來生產。二,球閥不能過重,過重可能會不聽話,這是很難自動關閉或打開閥門。有興趣的同學不妨一試,我相信你一定能夠創造出一個成功的。
❾ 請問什麼是PET切片技術 它的概念,技術發明時間以及應用范圍。
1937年,Alan Turing 想出了一個 "通用機器( )」 的概念,可以執行任何的演算法,形成了一個"可計算(computability)」的基本概念。Turing 的概念比其它同類型的發明為好,因為他用了符號處理(symbol 概念。 1939年11月,John Vincent Atannsoff 與 John Berry 製造了一部16位加數器。它是第一部用真空管計算的機器。1939年,Zuse 與 Schreyer 開鈶製造了"V2」〔後來叫Z2〕,這機器沿用 Z1的機械貯存器,加上一個用斷電器邏輯(Relay Logic)的新算術部件。但當 Zuse完成草稿後,這計劃被中斷一年。 科學計算器 1946年 ,第一台正式的電腦「埃尼阿克」在美國誕生,但十分耗電。 1959年,第一台小型科學計算器IBM620研製成功。 1960年,數據處理系統IBM1401研製成功。 1961年,程序設計語言COBOL問世。 1961年,第一台分系統計算機由麻省理工學院設計完成。 1963年,BASIC語言問世。 1964年,第三代計算機IBM360系列製成。 1965年,美國數字設備公司推出第一台小型機PDP-8。 1969年,IBM公司研製成功90列卡片機和系統——3計算機系統。 1970年,IBM系統1370計算機系列製成。 1971年,伊利諾大學設計完成伊利阿克IV巨型計算機。 1971年,第一台微處理機4004由英特爾公司研製成功。 1972年,微處理機基片開始大量生產銷售。 1973年,第一片軟磁碟由IBM公司研製成功。 1975年,ATARI——8800微電腦問世。 1977年,柯莫道爾公司宣稱全組合微電腦PET——2001研製成功。 1977年,TRS——80微電腦誕生。 1977年,蘋果——II型微電腦誕生。 1978年,超大規模集成電路開始應用。 1978年,磁泡存儲器第二次用於商用計算機。 1979年,夏普公司宣布製成第一台手提式微電腦。 1982年,微電腦開始普及,大量進入學校和家庭。 1984年,日本計算機產業著手研製"第五代計算機"——-具有人工智慧的計算機。1984: DNS (Domain Name Server) 域名伺服器發布,互連網上有1000多台主機運行。 1984年: Hewlett-Packard發布了優異的激光列印機,HP也在噴墨列印機上保持領先技術。 1984年1月: Apple 的Macintosh發布。基於Motorola 68000微處理器。可以定址16M。 1984年8月: MS-DOS 3.0、PC-DOS 3.0、IBM AT發布,採用ISA標准,支持大硬碟和1.2M高密軟碟機。 1984年9月: Apple發布了有512Kb 內存的Macintosh,但其他方面沒有什麼提高。 1984年底: Compaq開始開發IDE介面,可以以更快的速度傳輸數據,並被許多同行採納,後來更進一步的EIDE推出,可以支持到528MB的驅動器。數據傳輸也更快。 1985年: Philips和Sony合作推出CD-ROM驅動器。 1985年: EGA標准推出。 1985年3月: MS-DOS 3.1、PC-DOS 3.1。這是第一個提供部分網路功能支持DOS版本。 1985年10月17日: 80386 DX推出。時鍾頻率到達33MHz,可定址1GB內存。比286更多的指令。每秒6百萬條指令,集成275000個晶體管。 1985年11月: Microsoft Windows發布。但在其3.0版本之全面沒有得到廣泛的應用。需要DOS的支持,類似蘋果機的操作界面,以致被蘋果控告。訴訟到1997年8月才終止。 作者:DELL小張 13位粉絲 2009-5-27 16:44 回復此發言 31985年12月: MS-DOS 3.2、PC-DOS 3.2。這是第一個支持3.5英寸磁碟的系統。但也只是支持到720KB。到3.3版本時方可支持1.44兆。 1986年1月: Apple 發布較高性能的Macintosh。有四兆內
❿ 跪求,真的很感謝 ,石蠟切片製作中 ,封片前制好的切片需要再次脫水嗎。為什麼
需要。
切片一系列工作完成後,就要進行染色和封片了。由於要染色的切片尚包在石蠟中,而所用的染色液都為水溶液,因此在染色之前,必須再度復水。與固定的組織塊脫水、透明的步驟相反,石蠟切片先在二甲苯中溶去石蠟,再經過各級酒精,下行至水。
染色後,如果組織片中有水分,則光不宜通透,在顯微鏡下觀察不清組織的結構,所以必須經過脫水。
給你我們學校的實驗講義看看吧~希望對你有幫助~有不懂的地方問我~
實驗一 石蠟包埋切片技術
實驗目的:1、學習石蠟包埋切片技術的基本原理和基本步驟;
2、掌握石蠟包埋切片技術。
實驗原理:
大家在生物學實驗時,曾經觀察過動物組織和植物組織的切片。通過光學顯微鏡,我們可以觀察到細胞內部的結構(例如細胞核、細胞質、肌肉組織的橫紋等)、細胞相互間的聯系以及組織的構成等。那麼,如何來製作這種切片呢?其過程是比較復雜的,我們利用3—4次實驗來學習組織切片的製作。
大家知道,我們要在顯微鏡下研究生物體的內部結構,在自然狀態下是無法觀察的,因為整個動、植物體大部分都是不透明的,不能直接在顯微鏡下觀察,一定要經過特殊的處理,使要觀察的材料先減少它的厚度和體積,使光線能透過才能用顯微鏡觀察。通常應用的有兩種方法:一種是非切片法,即用物理或化學的方法將生物體組織分離成為單個細胞或薄片,例如我們在生物學實驗曾做過口腔上皮的觀察、洋蔥鱗莖表皮的觀察。這種方法的不足之處在於細胞彼此間相互的聯系不一定觀察到。另外一種為切片法,即用刀將標本切成薄片。
非切片法比較簡單,一學就會,我們這里不作介紹。
切片法也分徒手切片法和切片機切片法。最簡單的切片法是將新鮮植物材料直接用刀切成薄片,稱之為徒手切片法。切片機切片法是用特殊的切片機來切片,切片的厚度可薄到幾個微米。因此,切片機的發明與應用也是細胞學誕生的重要因素。
切片機切組織用的也是刀(切片刀),所要切的組織要有一定的軟硬度,如刀切肉(新鮮、冷凍)。但大部分生物材料比較柔軟,所以為了能切出薄片,必須先使所切材料有一定的軟硬度。一些包埋劑可以達到這個目的,如石蠟,它融化時可滲入到組織內部;凝固時,使整個組織有一定的軟硬度,正好能切出很薄的切片,故稱為石蠟包埋切片法。另外還有火棉膠包埋切片法(火棉膠做包埋劑)、冰凍切片法(使組織冷凍到一定的硬度)等。其中最常用的切片方法還是石蠟包埋切片法,我們這里重點學習石蠟包埋切片技術。
實驗器材:
(一)小鼠、小廣口瓶、標簽、量筒、燒杯、95%酒精、無水酒精、蒸餾水、手術刀、剪刀、鑷子、平皿、石蠟塊、濾紙、甲醛液、苦味酸、冰醋酸、移液管、洗耳球。
(二)恆溫箱、融蠟、紙盒、燙板、支架、酒精燈、火柴、小鑷子、濾紙。(擦載玻片、磨刀、液體石蠟)。
(三)手術刀、木板、酒精燈、火柴、鋸條、木塊、塑料板、切片刀、切片機、毛筆、小鑷子、載玻片、蛋白甘油、恆溫水浴箱、溫度計、大白盤。
實驗步驟:
製作小鼠肝、脾、腎、小腸等切片。
1、取材:取材是指從動物或植物體上割取所要觀察的組織材料,比如植物的莖、葉,動物的肝臟、小腸等。
取材時應注意以下幾點:
(1)新鮮:在割取材料時應愈快愈好,否則動植物體的細胞成分、結構及分布等就會發生改變。
(2)防止人為損傷:如生拉硬拽、擠壓等,以免出現人為損傷。
(3)大小:0.5 cm × 0.5 cm × 0.2cm。
2、固定:機體死亡或組織離體後,組織細胞由於血液供應停止,即可發生缺氧,導致生物氧化過程停止。相反,細胞內的無氧酵解酶類活躍,使組織內蛋白質、糖、脂肪降解,導致組織發生自溶。另外,組織也可因污染細菌而發生腐敗。因此,為了使細胞和組織結構保持生活時的狀態,必須進行適當的固定。固定的目的在於保存組織內細胞的形態、結構及其組成,使其與生活時相似。
固定組織的物質——固定劑——具有凝固或沉澱組織蛋白的作用,因此能抑制酵解酶類的活動和細菌的繁殖,從而呈現對組織的固定作用。
固定劑的種類很多,最常見的有乙醇、甲醛、冰醋酸、苦味酸、鉻酸、重鉻酸鉀、氯化汞和鋨酸等8種。各種固定劑對蛋白質、脂肪、糖等作用不同,因此,單一的固定劑不能保存所有的成分,故多用混合固定劑。
各種書籍對固定劑的介紹特別多,如化學性質、固定的原理、固定組織的優缺點等,由於時間的所限,我們這里不作詳細介紹,僅介紹幾種常見的固定液及其配方和用途。
(1)10%福爾馬林液:1份甲醛液 + 9份蒸餾水
市場上出售的甲醛液約含37-40%的甲醛,10%福爾馬林液實際上僅含3.7-4.0%的甲醛。
適用范圍:各種組織。但是經10%福爾馬林液固定的組織,細胞核染色較好,而細胞質染色較差。
處理:組織塊一般固定16-24h,長時間亦可,甚至可用來長期保存組織塊。短時間固定的組織塊不需水洗,可直接轉入70%酒精脫水。
(2)Bouin氏液:苦味酸飽和水溶液(1.22%) 75ml (15)
甲醛液 25ml (5)
冰醋酸 5ml (1)
適用范圍:各種動物組織及植物組織的根尖,是動物組織良好的固定液。
處理:固定24h,也可在此液長期保存。流水沖洗或不經水洗直接入70%酒精脫水。
(3)Zenker氏液: 甲液:氯化汞(升汞) 5g
重鉻酸鉀 2.5g
硫酸鈉 1g
蒸餾水 100ml
乙液:冰醋酸 5ml
使用前將甲、乙兩液混合。
適用范圍:為一般動物組織的優良固定液,經其固定的組織,細胞核及細胞質染色頗為清晰。
處理:固定時間為16-24h,然後流水沖洗一夜以洗去氯化汞,再入70%酒精脫水。切片染色前要用碘液除去汞沉澱。
(4)Gendre氏液: 苦味酸飽和酒精液(8.96g/100ml95%酒精) 85ml
甲醛液 10ml
冰醋酸 5ml
適用范圍:用於檢查動物組織中的糖原(因為糖原溶於水)。
處理:固定3-6h,直接轉入95%酒精脫水。
(5)Carnoy氏液: 無水乙醇 60ml
三氯甲烷 30ml
冰醋酸 10ml
適用范圍:用於檢查動物組織的核酸、糖原等。
處理:固定2-6h,直接轉入95%酒精脫水。
還有多種多樣的其它固定液。固定液的選擇應根據所要固定的材料以及檢查的目的而定。
3、沖洗:材料自固定液中取出後,需立即沖洗,使其中所有的固定液全部除去,以妨礙染色。
有些固定液,如10%福爾馬林液、Bouin氏液固定的材料,若時間較短的話可不必沖洗。但時間過長亦需沖洗。
沖洗的方法:組織塊放在瓶內,膠管插入瓶內接通自來水,瓶口用紗布包住。流水沖洗一夜,即能達到沖洗的目的。
4、脫水:脫水的目的在於使組織中的水分完全除去。因為組織塊將來要在石蠟
中包埋,而水和石蠟是不相溶的。必須經過脫水後,才能進入包埋階段。
常用的脫水劑有乙醇、丙酮、正丁醇等,最常用的還是乙醇。利用脫水劑吸水的特性,在各級濃度脫水劑中逐漸吸取組織中的水分。乙醇脫水的過程一般從70%乙醇開始,經80%、90%、95%、100%(二次)而完成脫水過程。每向後轉移前,須先將組織塊上的液體用吸水紙吸干,以免影響後續乙醇的濃度。
脫水時應注意:(1)在高濃度或無水乙醇中,每級停留的時間不宜太長,否則可使組織收縮變脆,影響切片;(2)如需過夜,應停留在70%乙醇中,也可長期保存,可防止因時間倒不開而影響後續步驟。
5、透明:脫水後是否可以進入包埋呢?但因脫水劑與石蠟也不相溶,因此在包
埋前,需要一種既能溶於脫水劑又能溶於石蠟的物質——透明劑——來起中間置
換作用。
所以,透明的目的在於使組織中的乙醇或丙酮被透明劑所代替,以使石蠟能很順利地進入組織中。另外,還能增強組織的折光系數,故稱透明劑。
透明劑的種類很多,常用的有二甲苯、甲苯、苯等。二甲苯為最常用的透明劑,二甲苯能溶於醇及醚,亦為石蠟溶劑,但不溶於水,它的透明力很強。
透明過程:一般經過1/2二甲苯-1/2無水乙醇,兩次二甲苯。
透明徹底的標准:胃、腸、結締組織等比較透明;肝、腎、心、肌肉等組織呈暗紅色浸油狀態,則說明脫水、透明良好。如果組織進入二甲苯30min以後還不變色,或中心有白色,說明水分未脫凈,應返回無水乙醇繼續脫水。透明這一步至關重要,若透明時間不足,則石蠟進不去,不能切片;若透明時間過長,則使組織收縮變脆、變硬,切片易碎。這一步要靠經驗。
6、浸蠟:浸蠟就是將石蠟透入整個組織的過程。
所謂石蠟包埋切片法,是用石蠟來浸透、包埋組織塊,再進行切片和染色的
製片方法。
石蠟為最常用的包埋劑,有幾種不同熔點的石蠟,通常所用的石蠟的熔點為54-58℃。
浸蠟過程:在60℃的溫箱內已融化的石蠟中經兩次各1h,使石蠟浸透組織。
浸蠟時注意溫度不宜過高,浸蠟時間亦不宜過長,否則會引起組織變硬、變脆,影響切片。
7、包埋:包埋就是被石蠟浸透的組織連同溶化的石蠟,一起倒入一定形狀的器皿(如紙盒、平皿)中,然後使其凝固成蠟塊的過程。
包埋的過程:(1)折疊紙盒;
(2)用酒精燈加熱溫台及紙盒;
(3)往紙盒中倒入溶化的石蠟;
(4)放入組織塊,切面向下,並撥正位置;
(5)蠟塊凝固。
從取材到包埋是一個連續的過程,往往連續幾天,如果沒有計劃、沒有完善的安排,就有可能和其他上課時間發生沖突,或造成半夜出勤。有時單憑記憶,把前後順序顛倒或超過了規定時間,會造成實驗失敗。因此需預先編制一個日程表。
【建議時間】
乙醇脫水:70%:16:30
80%:第二天7:20
90%:9:20
95%:11:00
100%(Ⅰ):12:00
100%(Ⅱ):13:00
透明:1/2二甲苯-1/2無水乙醇:14:00
二甲苯(Ⅰ):14:20
二甲苯(Ⅱ):14:40
浸蠟:石蠟(Ⅰ):15:00
石蠟(Ⅱ):16:00
包埋:17:00
注意事項:(1)動作要迅速;(2)融蠟別滴到桌面、地上。
8、切片:在包埋後,就可以進行切片。在切片之前,還需對包埋好的組織塊進行修整,並貼附於木塊上,才能進行切片。
修塊:以每一組織塊為單位,用小刀將組織塊大體修成長方形或梯形,組織的周圍須留1-2mm寬的蠟邊。
固著:用酒精燈燒熱金屬片,將組織塊切面的對立面稍燙熔一下,並立即貼於木塊上。
切片機的構造:
切片機是用來做各種組織切片的一種儀器,其樣式很多,性能也不一樣,一般可分為兩大類型,即滑行式切片機與旋轉式切片機。我們使用的是旋轉式切片機。其主要結構分為3部分:(1)控制切片厚度的微動裝置;(2)供裝置切片刀的夾刀部分;(3)供裝置組織塊的夾物部分。旋轉輪每旋轉一次,微動裝置就按所調節好的切片厚度以水平方向將組織塊向前推進一片的厚度。
切片操作:
(1)固定切片刀:刀刃向上,保持水平。調好角度,一般在4-6度。
(2)固定組織塊。
(3)調整所需要的切片厚度:一般在6-10微米。
(4)移動持刀器,或拔開齒輪上的牽引鉤,前後轉動齒輪以移動組織塊固定器,調節組織塊表面和刀刃的距離,以剛要接近時為止。
(5)調整組織塊與刀刃之間的角度和位置:組織塊的切面及上下邊須與刀刃平行。
(6)粗切:右手搖輪,左手轉動齒輪,慢慢將組織塊切到組織本身。
(7)切片:右手轉動搖輪,轉一圈可切下一片,切第二片與第一片連在一起,即成連續切片。左手用鑷子或毛筆提起切片的下端,輕輕向自身方向拽,使切片成連續的帶狀。
(8)展片:停止切片,右手用另一支毛筆輕輕將蠟帶跳起,靠刀刃的一面向下,慢慢接觸40-45℃的水面,藉助水的表面張力使其在水面展開。如有小的皺褶,用小鑷子輕輕分開。應注意:水溫過高,易使切片全部融化;水溫過低,切片不宜伸展。
(9)貼片:即將切片貼在載玻片上。先將連續切片分成一片或小段。將載玻片1/2處均勻塗一層薄薄的蛋白甘油(等量的雞蛋清和甘油混合而成,防止脫片。切勿塗得過多!),將載玻片垂直插入水中,以塗有蛋白甘油的面貼近組織片,提起載玻片使組織片貼附在載玻片上。用小鑷子將切片擺在載玻片1/3和2/3的交界處,並擺正位置。然後在52-60℃恆溫箱烤乾。
整個石蠟包埋切片技術至此全部結束。
實驗二 蘇木精-伊紅染色
實驗目的:1、了解染色的基本原理和基本方法;
2、掌握蘇木精-伊紅染色方法。
實驗原理:
一、染料的一般知識
1、染料的染色原理:(1)化學作用:染料的性質有酸、鹼、中性之別,那麼組織中的鹼性部分(如細胞質)易和酸性染料親和而發生作用,組織中的酸性部分(如染色質)易和鹼性染料親和而發生作用。(2)物理作用:指吸附或溶解作用。組織蛋白和某些染料有相互吸附的作用。
2、媒染劑、促染劑和分化劑
媒染劑:某些天然染料(如蘇木精),本身無著色性,要與其他物質結合後才具有著色性,這些被結合的物質稱為媒染劑,如許多鐵鹽、鉻鹽及鉀鹽等。
促染劑:是促進染料著色性的物質,如冰醋酸是伊紅的促染劑。
分化劑:能使切片上需要顯示的結構清晰,而使不需要顯示的結構脫去顏色的物質。如1%鹽酸酒精。
一、蘇木精-伊紅染色(H.E染色)
所做出的石蠟包埋切片可應用的染色方法很多,應根據不同的檢查目的而選用不同的染色方法。而最為常用的染色法為H.E染色。
1、蘇木精(蘇木素、蘇木紫)(hematoxylin):為從蘇木中提取。蘇木精本身不是染料,不能直接染色,必須經氧化才能染色。可以在空氣中自然氧化,但需時很長,所以一般都是加氧化劑(如碘酸鈉)氧化。同時,被染材料又須經媒染劑作用後才有著色能力,所以在配製蘇木精染液時,都加有媒染劑。蘇木精液主要著染細胞核。
有數種不同配方的蘇木精液。
Mayer(梅耶)氏蘇木精液:
蘇木素 1g
硫酸鋁鉀 50g (媒染劑)
碘酸鈉 0.2g
水合氯醛 50g
檸檬酸 1g
蒸餾水 1000ml
2、伊紅(曙紅)(eosin):又分幾種,如伊紅Y、伊紅B等。
伊紅對細胞質、肌纖維、膠原纖維具有著色性。
一般用0.5%伊紅/70%乙醇液或1%伊紅水溶液。
由於蘇木精著染細胞核,伊紅著染細胞質,所以這種方法稱為雙重對比染色法。
實驗材料:石蠟切片、蓋玻片、小鑷子、大鑷子、樹膠、濾紙、紗布、染色缸、二甲苯、乙醇系列、Mayer氏蘇木精液、0.5%伊紅酒精液(或1%伊紅水溶液)、1%鹽酸酒精、蒸餾水、顯微鏡。
實驗步驟:
1、切片脫蠟、復水:
由於要染色的切片尚包在石蠟之中,而所用的染色液都為水溶液,因此在染色之前,必須再度復水。與固定的組織塊脫水、透明的步驟相反,石蠟切片先在二甲苯中溶去石蠟,再經過各級酒精,下行至水。
把玻片放入盛有二甲苯的染色缸中以溶去石蠟(20min),再經第二缸二甲苯(10min)。經100%、95%、90%、80%、70%各級酒精、蒸餾水入水,每級3-5min。
2、入蘇木精液染5-7min。
3、流水洗去附著染液,(在1%鹽酸酒精中蘸3-4下),然後流水沖洗20min使切片由淡紅色變為灰蘭色。
4、入伊紅染液5-7min。
5、脫水、透明:
如果組織片中有水分,則光不宜通透,在顯微鏡下觀察不清組織的結構,所以必須經過脫水。透明劑能增強組織的折光系數。這樣,才能在顯微鏡下觀察。
在70%、80%、90%的酒精中每級各蘸3—4下,再經95%、100%Ⅰ、100%Ⅱ梯度酒精,每級各5min。在二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中分別透明10min。
6、封片:
從二甲苯中取出載玻片,未等二甲苯揮發,在組織切片上滴加適量樹膠,上面再加蓋玻片(傾斜放下)封固。
封片目的:(1)便於保存;(2)應用合適折光率的封藏劑使組織結構能在鏡下很清晰地顯示出來。
結果:細胞核呈藍色至深藍色,細胞質呈淡紅色或紅色。
作業:1、為什麼生物體的組織要經過如此繁瑣的步驟才能觀察其組織結構?
2、查閱文獻,有哪些文章採用石蠟包埋切片和H.E.染色?
3、通過查閱文獻,談一下石蠟包埋切片和H.E.染色的用途。