❶ thinkpad t系列怎么样
肯定是很不错的。thinkpad本身就是超一线的品牌了,质量做工散热全是有保证的。
并且t系列是thinkpad各个系列中很高档的一个系列,更有保证了。最高档的系列就是t x这两个系列的了。
❷ 为什么g418磷酸化后就没有毒性了
请
这是我搜索的,贴上看看是否有帮助!
原理
分析转化的功能和表达需要DNA稳定转染至宿主细胞染色体。外源基因进入细胞后,部分能够通过细胞质进入细胞核内,根据细胞类型,至多80%的进入核内的外源DNA得到瞬时表达。极少数情况下,进入细胞的外源DNA通过系列非同源性分子间重组核连接,形成巨大的***结构最终整合进细胞染色体。细胞基因组自由部分表达,所以整合并不一定意味着表达,只有整合到表达区的基因才会表达,而且整合到不同的染色体区段的外源基因的表达的量也是不同的。由于摄取、整合、表达外源基因是小概率事件,通常根据新表型筛选稳定转染体。一般情况下这种新表型由共转染的编码抗生素抗性基因提供。细菌Tn5转座子序列(neo抗性基因)携带的氨基糖苷磷酸转移酶可以将G418转变成无毒形式。G418是一种氨基糖类抗生素,其结构与新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似,它通过影响80S核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞都有毒性 ,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。是稳定转染最常用的选择试剂。当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。
在进行转染时细胞膜受到影响,抗生素可能对细胞产生较大影响,加上G418有杀菌作用,所以有人主张转让时不加其它抗生素。其实G418本身有很好的杀菌效果,在用G418进行筛选的过程中很少会发生污染。但有一点,其实我觉得问题也不是很大,那就是:在老外的一本实验手册中提到,在脂质体转染时所用培养基中最好不加任何抗生素。我想他的想法可能是脂质体对细胞膜有影响,可能此时加抗生素对细胞损伤较大。因为庆大霉素、链霉素、G418均是氨基糖甙类药物,其药理作用完全一样。所以没有必要再用,而且由于另外抗生素的添加实际增加氨基糖甙类药物的浓度,剂量有误差,不利于各实验室之间的交流,在实际操作中,培养液中有抗生素对细胞培养与筛选影响不大。
有人认为用磷酸钙共沉淀转染法筛选稳定整合子较好,但这种观点是很多年以前的观点了,而且只是少数人的观点。我两种方法都用过,但没有特异的比较过,感觉都可以。磷酸钙便宜,但对溶液配置和实验操作要求很高,尤其是溶液的PH值,要求精确到小数点后2位。脂质体是现在主流的转染试剂,从没有人说这种方法做整合稳定表达不行。非脂质体是这几年发展很快的技术,转染效率低,细胞毒性小,价格也不贵,Qiagen就有一个系列。我个人觉得不必要花太多时间在这方面,自己实验室用得好的技术可以坚持,没有经验的可以选择一个较著名的公司的产品开始,购买之前先下载个说明书看看。有精力就比较一下几种方法,一般的用达到目的就行了。关键是实验设计。
G418和筛选
筛选之前
由于每种细胞对G418的敏感性不同,而且不同的厂家生产的相同浓度的G418的活性不尽相同,所以在筛选之前,一定要确定G418的最佳筛选浓度。具体如下:将细胞稀释到1000个细胞/mL,在100ug/mL~1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选,选择出在10~14天内使细胞全部死亡的最低G418浓度来进行下一步的筛选试验。
由于每种细胞对G418的敏感性不同,一般变动在100ug/ml~1000ug/ml范围。而且不同的厂家生产的相同浓度的G418的活性不尽相同,所以在筛选之前,一定要确定你的细胞对这一批G418的最佳筛选浓度。尽管如此,特性明确的细胞系G418的最佳用量还是稳定的。《分子克隆》给出了几个常用细胞系所需G418的最佳用量。
细胞系或机体 G418浓度(ug/ml)
中国仓鼠卵巢细胞 700~800
Madin-Darby犬肾细胞 500
人上皮A431细胞 400
猿CV-1细胞 500
盘基网柄菌属 10~35
植物 10
酵母
125~500
看下面的一个试验:3×106个细胞电转后,分别接种1/4000,1/1000,1/300细胞到24孔板中,48 h后加药筛选,此时1/300细胞孔内大约50%汇合度。理论上1/4000孔内应有4%的汇合度。筛选9天后,观察1/4000孔内有两三个克隆,按比例1/300孔内应该有几十个克隆,事实上,它们几乎全死光了,只有几个克隆。所以汇合度对G418筛选结果的影响很大,一般筛选时汇合度不宜超过50%!
加药时间
由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早;但是也不能太晚,因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大,增值较慢,时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没,最终导致筛选不出阳性克隆,一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降,所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。
培养液
加药筛选约6天左右,细胞会大量死亡,孔中只剩下的细胞寥寥无几。这时会出现两个问题:1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质,导致那些有neo表达的阳性细胞死亡,即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少,细胞之间的信号会变得很弱,也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液:假如你要转染3T3细胞,在3T3细胞汇合度达到80%的时候,换液,培养过夜之后收集培养液,通过滤器消毒,和新鲜的培养液按1:1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。
挑选单克隆的优化
为了尽量减少阴性克隆的死亡给阳性克隆造成的不利影响以及增加阳性克隆的得率,可以应用套环法或刮除法结合有限稀释法来筛选阳性克隆。加药后,在高倍镜下,阳性克隆和阴性克隆很容易辨认,在阳性克隆下用记号笔做个标记。然后刮除隐性克隆,消化阳性克隆后继续筛选培养;或则用套环套住阳性克隆,在套环内加胰蛋白酶或EDTA消化,把消化液吸到另外一个新的孔中培养。最后再用有限稀释法把阳性克隆在96孔板中筛选。
鉴定之后
一般经过4周左右的筛选,得到的阳性克隆都比较稳定。但是外源基因如果没有整合到基因组中的话,目的基因还是很容易丢失的。但是外源基因整合到基因组中的概率太小了,而且是随机整合,会导致表达的目的蛋白的量产生很大差异。随着培养时间的延续,那些丢失了外源基因的细胞和很少表达目的基因的细胞会占据优势,强表达目的蛋白的细胞会越来越少。这样再次筛选是必不可少的。只有经过2次以上的筛选之后才能找到那种我们想要的强分泌目的蛋白的,遗传稳定的细胞克隆。
Protocal
1.G418的配制: 取1g G418溶于1ml 1M的HEPES液中,加蒸馏水至10ml,过滤消毒,4度保存。
2.细胞培养:取待测培养细胞,制备成细胞悬液,按等量接种入多孔培养板中,培养6小时左右开始加药。
3.制备筛选培养基:在100ug/ml~1000ug/ml范围内确定几个梯度,比如先做个100ug/ml、400ug/ml、800ug/ml、1000ug/ml,按梯度浓度用培养基稀释G418制成筛选培养基。
4.加G418筛选: 吸除培养孔中培养基,PBS洗涤一次,每孔中加入不同浓度的筛选培养基。
5.换液:根据培养基的颜色和细胞生长情况,每3~5天更换一次筛选培养基。方法同4。
6.确定最佳筛选浓度:在筛选10~14天内能够杀死所有细胞的最小G418浓度即为最佳筛选浓度。在第一轮就筛选出最佳G418浓度的可能性不大,最有可能的是出现这种情况:用某一浓度G418的量在筛选14天后还不能杀死细胞,而用下一个梯度的 G418的量在10天前就看不到活细胞了。假如是400ug/ml不能杀死细胞,而800ug/ml在第5天就把所有细胞都杀死了,则可以再用500ug/ml、600ug/ml、700ug/ml进一步筛选,以确定最佳筛选浓度!心得:由于特性明确的细胞系G418的最佳用量还是比较稳定的,所以有时候不需要在这么大范围内进行筛选。比如说你要转染NIH3T3细胞 ,现在我告诉你我测试过NIH3T3细胞对G418的敏感性,我用的筛选浓度是200 ug/ml。这时你就可以做150ug/ml、200ug/ml、 300ug/ml三个浓度进行筛选。
通过预实验确定了最佳筛选浓度后,就可以做稳定转染了。
a 转染:转染后培养24小时或者更长,到细胞增长接近汇合时按1:4密度传代,继续培养,待细胞密度增至50%~70%汇合时;
b 加G418:去掉培养液,PBS洗一次,加入按最佳筛选浓度配制好的G418筛选培养基。
c 换液:根据培养基的颜色和细胞生长情况,每3~5天更换一次筛选培养基。当有大量细胞死亡时,可以把G418浓度减半维持筛选。 筛选10~14天后,可见有抗性的克隆出现,停药培养,待其逐渐增大后;
d 挑单克隆:制备细胞悬液,细胞计数,用培养基稀释细胞到1个/10ul。在96孔板中加入培养基150ul/孔,再加入细胞悬液10ul/孔。待其逐渐增大后转入到48孔中增殖。
e 单克隆鉴定:细胞大量扩增后,提取总RNA,做RT-PCR检测目的基因是否存在。
常见问题:
1.转进去的重组质粒以什么形式存在于细胞内的?
无怪乎两种形式:整合在染色体中和存在于细胞质中。没有经过筛选前大部分转染进细胞的质粒是存在于胞质中的,但是这种质粒是不稳定的,基本上筛选不出这种单克隆,只有稳定整合入染色体的才是我们想要的稳定细胞系。
2.neo基因和目的基因是不是一定会整合在一起?
整合是随机发生的非同源性重组,neo基因表达而目的基因不一定都表达,所以在筛选之后还要用RT-PCR的方法进一步鉴定。
培养基处理的个人技巧
体内的任何细胞被置于体外培养后,对环境都有一个适应过程,期间细胞对培养液具有同化作用,即细胞从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排出自己的代谢产物和其它一些物质,其中有排泄物也有促细胞生长因子。这个过程也是细胞同化培养基的过程。细胞越多则其同化作用越强,所以细胞数目多比数目少较易生长。在筛选后期,大批细胞死亡,不换液没有死亡的细胞就会受到死亡细胞的影响,换液后残留的少量细胞对培养基的同化作用不强,也不利于生长。我是用适应性培养基来解决这一问题的:
适应性培养基的配制
a 培养同源细胞至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液
b 离心:3000~4000rpm 10 min后,吸取上清液
c 虑过:再经直径0.22um滤器过滤,再加入2倍体积的新鲜培养基,低温冻存备用。
eeflying
1. G418筛选要做预试验确定最佳浓度,将细胞稀释至1000cell/mL,每孔100uL加入有培养基的24孔板,将每孔中的G418浓度稀释至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1100ng/mL等12个级别。培养10-14天,以最低细胞全部死亡浓度为基准,一般400-800左右,筛选时比该浓度再高一个级别,维持使用筛选浓度的一半。
2. 我们掌握是传过10代以后用维持量,但不能不用,因为有时候抗性基因会丢失,如果没有G418,很快会形成优势的。
3. 即是有G418抗性,也不一定有目的基因,单克隆化操作是很重要的。
转染后,每个细胞内目的基因与宿主染色体的整合状况是不同的,目的蛋白表达有的多,有的少,外源蛋白表达少的细胞由于代谢负荷较小,所以生长较快,在生长若干代之后,表达少的细胞会形成优势,长期之后,表达最弱的细胞会由于竞争优势占主要,转绿色荧光蛋白基因后,表达越来越暗就是这个道理。所以,要进行单克隆化操作,使得到的均来自于同一祖先细胞,遗传性状尽量一致,也是对高表达细胞的保护。
操作用96孔板法,每代细胞长满后,大多数冻存,留200cell左右就可以进行该操作了, 该方法在很多关于单克隆抗体和细胞原代培养书中均有讲述。
1. 可以肯定的是,外源基因与宿主染色体之间的整合是随机的而且不是单拷贝的,这点我们做过FISH验证过,表达量与整合数目,上游序列特性,特定部位DNA立体结构都是相关的,装入了SV40只是增加了表达了数目,但并不能掩盖其它因素对表达的影响。按你的讲法,转染完GFP的细胞应该亮度一致,但实际上差别很大。neo基因也是这样,而且,同一细胞中不同基因的拷贝数不会相同,不同细胞同一基因的数目也不会相同,这点可以用数学关于泊松分布的观点理解。有时,neo表达了,但目的基因丢失了的情况也是有的。
2. 那为什么还要筛选基因?是这样,用概率论的思维来理解,某一细胞内随机含有一定数目拷贝数外源基因基因,那么,一种基因拷贝数为0的可能性,及所有拷贝均为另一种基因的概率就很小,很大的概率为外源基因的不均质。打个比方,一个大口袋,抓100个红球,再抓100个黄球,然后以从中抓若干个,这些球均为红球的概率有多大呢?应该是很小的。红球就是neo,黄球就是你的目的基因。我们用neo,实际上是筛选的外源基因整合的数目,怎么说呢?用刚才的例子来说,如果我们抓着5个红球,另一次抓着10个红球,可以肯定,第二次抓的球比较多,那么第二次黄球数目比第一次多的概率就很大了。因为二者出现的概率比是恒定的。
3. 维持就是只要养这种细胞,就要维持。可以再低些,但不能没有。或者隔一定时间从新使用筛选量压一下,我不知你是否干临床,想想抗生素的用药原则,反向思维一下,实际上我们在筛选耐药株呀。
4. neo的产物是酶,过高的G418浓度就要有更多的neo酶来支持,否则细胞也要被毒死的,而此时过多的酶要求会对细胞代谢造成太大负担,细胞可能因此无法完成分裂与增殖,我们曾试过,即使在同一转染阳性细胞,在不同浓度的G418液中生长速度也不同,严重形态也不同。这就是酶与底物的比例关系嘛,这回不用数论的,用米氏方程理解吧。
5. 胰酶的作用不必理会,有的细胞受影响,还有的细胞不受影响,由几代之后,不受影响的细胞会占优势的。
仅是我从临床抗生素和化疗药的使用原则中悟出的道理,实在是个人经验,而且在基础科学领域顶多算票友,我还是想听听诸位专业人士的理解和经验。
在第10天左右就手挑单克隆或者96孔板单克隆操作了
本帖开始我就讲了如何确定基准浓度,筛选浓度是基准浓度的高一级,维持用筛选浓度的一半。
Feynman_R
汇合度(confluence)也许是我们实验室的翻译,实际上就是指细胞占培养表面的比例,如果细胞铺满了整个容器,我们就认为它们100%汇合,也就是汇合度100%。
最近的一个实验是:3×106细胞电转后,我把电激杯中的细胞分别接种1/4000和1/1000和1/300到24孔板中,48小时后加g418筛选,这个时候接种了1/300细胞的孔会大约50%汇合,而理论上接种了1/4000细胞的孔会4%左右汇合,今天是筛选后第9天,观察到1/4000孔有两三个小克隆,按道理1/300孔会有20-30个克隆,但实际的情况是它们几乎全部死光了,仅有少数存活细胞!
所以我认为汇合度对g418筛选影响很大,这耽误了我将一个多月。
jiangql 同意菊花与刀对你的建议。我的感觉G418筛选时间太长,到后来一般会对细胞生长有影响。以下是一些建议,供参考:
首先需要扩增细胞,冻存部分中间产物细胞后,再做克隆化比较合适,否则一旦污染就会全军覆没。
一般5~7天后G418就可以减半维持。
勤换液,去除死细胞,可以减少对存活细胞的影响。
血清浓度可以高到20%,质量要好。
在此输入您的回答,每一次专业解答都将打造您的权威形象
❸ 想升级我的电脑,希望可以能流畅做平面图,cad,ps之类的软件请问怎么配置。尽量保持能用的硬件!
架构太旧,如果是用作专业应用的,想单升级某几样配件以达到流畅处理效果是不可能的。因为现在是整体架构升级,换一样新型号的配件,其它配件基本通通都要换掉,不象以前,可以换一二样配件就可以达到不错的性能提升。你现在想在原有的基础上更换配件,也只能换旧式二手配件,性能和质量都不能保证,花钱换了也远达不到你想象中的效果。所以并不建议你这样升级,没必要。
你上淘X,上有好多400~500的二手主机,配置都比你现在的强多了,你不想多花钱的,可以考虑下这些主机。
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如果主机预算2300内装新配件,建议装AMD的集成核显,虽然专业软件应用最好是用INTEL,但必需配独显。
方案一:
AMD A10-5800K 870元
梅捷SY-F2A85+节能版 550元 大板 (梅捷SY-F2A55M-RL 390元 小板)
金士顿DDR3 1600 4G骇客神条套装(2GX2)200元双通道内存模式
希捷Barracuda 500G 16M SATA3 330元
长城双动力BTX-380P4 300W 180元
DVD刻录机110元
机箱60
这个配置没有独显,可留以后手头松动直接装块800~1000左右级别的A卡。但现在用的CPU核显 HD 7660D是目前性能最好的。比一般600块以下入门级独显还强,和N630和R6670这级别的型号类似,比这些型号的D3版还强,比这些型号的D5版弱。所以就算前期也有不错的画面处理性能。
方案二:
Intel酷睿i3 3220/盒装 750元 全新第三代I3
微星B75MA-E33 480元
金士顿DDR3 1600 4G骇客神条套装(2GX2)200元双通道内存模式
希捷Barracuda 500G 16M SATA3 330元
长城双动力BTX-380P4 300W 180元
DVD刻录机110元
机箱60
这个配置同样没独显,因核显性能远不好方案一中的AUP,前期没装独显时的图像处理性能不如方案一。但如以后同样升级一块800~1000级别的独立N卡,那整体性能比方案一强多了。因CPU性能一直是AMD的弱项。
❹ 70迈行车记录仪
70迈行车记录仪不好,只能录二天视频
❺ thinkpad t系列好在哪里
首先T系列是ThinkPad经典商务系列。
早在IBM时期就已经存在过的,其前身为IBM ThinkPad 600,
2000年,IBM ThinkPad的产线进行了整合,其中原IBM ThinkPad 600系列更名为T系列,第一代T系列:T20问世。
自2000年第一代T系列一直延续至今,19年的光辉岁月。
T系列,因“Thin & light for Travel”中的字母“T”而得名,代表“性能与便携的完美平衡”,每一代T系列产品都秉承着这样的设计理念。在注重一定便携性的同时又兼顾扩展性、性能,在它们之中形成了一种平衡点。
T系列,一直以来都是ThinkPad家族中的“中流砥柱”,这是最让我为之吸引的气质。
所以傲雪本人手中拥有了多台T系列产品:
T410i、T420、T420s(已转让)、T530、T440(已转让)、T460s,未来可能会购置T480s
❻ 请帮我翻译这段话吧
它正在诱惑说,他们是空前的, 是不请求疑问在手边。
先例是什么他们的过去经验的人们发现指导他们的现在行动。 相反地,行动通常反映经验的指导。 无真的空前。 以一种新的情形面对了,人对熟悉的一些比喻它而且根据被感觉的类似塑造他们的回应。 在计算机的情况,是新的是在练习中使它的在下面理论上的结构可实现的可靠的电子电路。 基本上,它是在真正的时间和空间的限制里面操作了的一部 Turing 机器。 那么多是空前的。 超过那,先例作形了计算机。 Turing 机器是一个可能无穷类型的特别的申请一个开着的轮廓。 计算机要如何被用仰赖经验和要使用它的人的期待或者要设计它让其它使用。
当来自在 " 软件危机 " 的起源上的 1950 到 1970个聚焦的计算机业的发展的历史的部份之时, 我现在正在尝试决定什么人们
当他们最初开始谈论 " 软件工程学 " 的时候,认为。虽然一位作家已经建议,期限 1965,2 开始了它首先在 1967 年进入通常的通货了 , 研究何时在北大西洋公约组织科学委员会的计算机科学上聚集在主题上要求一个国际的会议。 当布莱恩 Randell 和彼得 Naur 在对他们的进行的版本的介绍方面指出之时,"片语 '软件工程学' 故意地被选择当做在气人的 , 在暗示对软件产品的需要方面是 [ 基础的 ] 在理论上基金会的类型和实际的训练上 [,] 哪一在工程学的确定部门中是传统的 ."
❼ dna结构不同所以抗生素作用效果不同 为什么
可以做150g/ml、 200g/ml、300g/ml三个浓度进行筛选。为分析转化的功能和表达需要DNA稳定转染至宿主细胞染色体.外源基因进入细胞后,部分能够通过细胞质进入细胞核内,根据细胞类型,至多80%的进入 核内的外源DNA得到瞬时表达.极少数情况下,进入细胞的外源DNA通过系列非同源性分子间重组核连接,形成巨大的***结构最终整合进细胞染色体.细胞 基因组自由部分表达,所以整合并不一定意味着表达,只有整合到表达区的基因才会表达,而且整合到不同的染色体区段的外源基因的表达的量也是不同的.由于摄 取、整合、表达外源基因是小概率事件,通常根据新表型筛选稳定转染体。一般情况下这种新表型由共转染的编码抗生素抗性基因提供.细菌Tn5转座子序列 (neo抗性基因)携带的氨基糖苷磷酸转移酶可以将G418转变成无毒形式.G418是一种氨基糖类抗生素,其结构与新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似,它 通过影响80S核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞都有毒性,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞,也包括原生动物和蠕虫.是稳定转染最常用 的选择试剂.当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效 表达,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长.G418的这一选择特性,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛 应用.在进行转染时细胞膜受到影响,抗生素可能对细胞产生较大影响,加上G418有杀菌作用,所以有人主张转让时不加其它抗生素.其实G418本身有很好 的杀菌效果,在用G418进行筛选的过程中很少会发生污染.但有一点,在脂质体转染时所 用培养基中最好不加任何抗生素.可能是脂质体对细胞膜有影响,可能此时加抗生素对细胞损伤较大.因为庆大霉素、链霉素、G418均是氨基糖甙 类药物,其药理作用完全一样.所以没有必要再用,而且由于另外抗生素的添加实际增加氨基糖甙类药物的浓度,剂量有误差,不利于各实验室之间的交流,在实际 操作中,培养液中有抗生素对细胞培养与筛选影响不大.Protocal1.G418的配制: 取1g G418溶于1ml 1M的HEPES液中,加蒸馏水至10ml,过滤消毒,4度保存.2.细胞培养:取待测培养细胞,制备成细胞悬液,按等量接种入多孔培养板中,培养6小时左右开始加药.3.制备筛选培养基:在100g/ml~1000g/ml范围内确定几个梯度,比如先做个100g/ml、400g/ml、800g /ml、1000g/ml,按梯度浓度用培养基稀释G418制成筛选培养基.4.加G418筛选: 吸除培养孔中培养基,PBS洗涤一次,每孔中加入不同浓度的筛选培养基.5.换液:根据培养基的颜色和细胞生长情况,每3~5天更换一次筛选培养基.方法同4.6.确定最佳筛选浓度:在筛选10~14天内能够杀死所有细胞的最小G418浓度即为最佳筛选浓度.在第一轮就筛选出最佳G418浓度的可能性不 大,最有可能的是出现这种情况:用某一浓度G418的量在筛选14天后还不能杀死细胞,而用下一个梯度的G418的量在10天前就看不到活细胞了.假如是 400g/ml不能杀死细胞,而800g/ml在第5天就把所有细胞都杀死了,则可以再用500g/ml、600g/ml、700g/ml进一 步筛选,以确定最佳筛选浓度!心得:由于特性明确的细胞系G418的最佳用量还是比较稳定的,所以有时候不需要在这么大范围内进行筛选。
❽ 最近想买智能手机,在网上看到佳通G2佳域G2首派A80S决的很强大价格也便宜就不只这几个牌子是不是山寨求解
其实手机不能单纯的看硬件配置,比如酷派,很多款配置不低,可就是系统优化做得超级垃圾。
硬件只是一个方面,软件也很重要,它们用的都是联发科MTK的平台,跟之前的山寨机用的是同一家公司的平台,这个平台本身非常好,但是很多山寨厂的技术不过关,所以生产的手机很垃圾!据我观察,你提到的手机配置真的不低,但是价格很低,所以我觉得,如果很在意价格,不在意稳定性的话,可以购买
❾ 2500左右笔记本推荐
无解。
这个价位,如果你只是想1080P无压力,完全没问题
但你说还要制作视频,这个压力了,还有大型3D游戏,更压力了
我给你稍微科普一下显卡
你挑电脑显卡的时候就会注意到,有一部分显卡的显存只用GDDR3甚至GDDR2,但容量却高达1~2G;而有些显存则疯狂启用到GRRD5的高频率,可容量却只有0.5~1G
这里还涉及到商业营销策略,也就是主动产品线和被迫产品线,这个不说,就说技术
高容量,低频率,适合类似于PS此类软件,位图编辑,需要大量显存,但对速度要求不算太高。
低容量,高频率,适合矢量类应用程序,比如CAD,或3D建模的,需要大量的计算,但并不要求有多少存储空间。
至于你说的电影,要看用CPU解析还是用GPU解析,源视频用的什么样的压缩方法、用什么样的解码器还原画面,比如说,是位图类的更多,还是矢量类的更多,是固定还是动态,这都有关系。
你说的游戏我没玩过,但3D引擎工作原理是一样的,与画面的刷新率(帧)和贴图质量有关
综合上面来说
看电影,要求CPU(GPU)能力强
做视频,要求CPU处理能力强,且显存容量大,内存容量同样要求很大
3D游戏,要求显存频率高,而且如果你还想画面质量好,显存至少要2G+
而且,我还真不知道有15吋以上屏幕的本,那得多大,多难看...
所以按你的要求,2500价位,别说本,台式都配不下来。你只能去寻求二手市场了。但话说回来,能达到这样性能要求的本,目前市场价至少4000+,这是能达到你要求的最低配置,得5000元级能正常。这样的本,即便是二手,也是很新的本,也不可能有2500的价位。换句话说,能卖你2500的二手本本,配置基本不达标。所以你这个要求是无解。除非你能遇到奇迹:一个新本,买回来就不想要了,而且没什么问题,还愿意低价转让。可遇不可求。脏物倒是有可能...不过...犯法......