瑞氏染液發明

⑴ 什麼是瑞氏染色

（二）瑞氏（ Wright ' s staim ；美藍－伊紅Y）染色：

1 ．瑞氏染料是由鹼性染料美藍（ Methvlem blue ）和酸性染料黃色伊紅（ Eostm Y ）合稱伊紅美藍 染料即瑞氏 （美藍－伊紅Y）染料。

伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子，無色部分為陽離子，其有色部分為酸性，故稱伊紅為酸性染料。美藍通常為氯鹽是鹼性的，美藍的中間產物結晶為三氯化鎂復鹽，其有色部分為陽離子，無色部分為陰離子，恰與伊紅鈉鹽相反。

2 ．用 甲醇作瑞氏 染料溶劑，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶劑，有兩種作用：

（ 1 ）甲醇使瑞氏染料中美藍（ M ）與伊紅（ E ）在溶液中離解，可使細胞成分選擇性吸附其中的有色物質而著色。

甲 醇

ME （瑞氏染料）—— —— → M + + E -

在配製的瑞氏染液中美藍如放置過久即可氧化而含有天青，美藍天青與伊紅化合物能使核染成紫紅色，但不能使胞漿染為藍色，多餘 美藍就可以 使胞漿染成藍色，染色主要是化學作用，是離子彼此結合的反應。

（ 2 ）甲醇具有強大的脫水力，可將細胞固定在一定形態及增加細胞結構的表面積，提高細胞對染料吸收作用，同時由於甲醇吸附染色液中的水，使染色液升溫，加速染色反應。

3. 瑞氏染液配製：

(1) 瑞氏染液配製：

瑞氏染料 830gm 或 1g

甲醇（ AR ） 500ml 或 600ml

先稱乾燥（事先放入溫箱乾燥過夜）瑞氏染料放置乳缽內， 用乳棒輕輕 敲碎染料成粉末，再行研磨至聽不到 研芝麻聲 即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸內顯「一面鏡」光澤，而無染料粉粒沉著，再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入 一 清潔儲存瓶內（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重復數次，直至乳缽內染料及甲醇用完為止，搖勻，密封瓶口，存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存 3 個月以上為佳。

(2) 緩沖液：

1) 緩沖液作用：染色對氫離子濃度是十分敏感的，據觀察 pH 值的改變，可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。 緩沖液須保持 一定的 pH 使染色穩定， PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8 ，偏鹼性染料可與緩沖液中 酸基起 中和作用，偏酸性染料則與緩沖液中的鹼基起中和作用，使 pH 恆定。

2) 緩沖液配製（ pH6.4~6.8 ，弱酸性）：

配方 1 ： 配方 2 ：

1% KH 2 PO 4 30ml M/15 KH 2 PO 4 73.5 ml
1% Na 2 HPO 4 20ml M/15 Na 2 HPO 4 26.5ml
H 2 O( 新鮮 ) 加至 1000ml
置室溫黑暗處，瓶口密封，防止黴菌污染，如有污染則應報廢。

⑵ 瑞氏染液的介紹

瑞氏染液由酸性染料伊紅和鹼性染料美藍組成的復合染料，溶於甲醇 ，後解離為帶正電的美藍和帶負電的伊紅離子。

⑶ 瑞氏吉姆薩染色原理

染色原理和結果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為鹼性蛋白質，與酸性染料伊紅結合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質；細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性，與鹼性染料美藍或天青結合，染紫藍色，稱為嗜鹼性物質；中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合，染淡紫色，稱為中性物質。

PH對細胞染色有一些影響。細胞里各種成分均不蛋白質，因為蛋白質系兩性電解質，帶電荷隨溶液PH而定，在偏酸性環境里正電荷增多，易和伊紅結合，染色為偏紅；在偏鹼性環境里負電荷增多，易和美藍或天青結合，染色偏藍。

所以細胞染色對氫離子濃度十分敏感，染色用正經片一定清潔，要無酸鹼污染。配製頊特液一定用優質甲醇，稀釋染色一定用緩沖液，沖洗一定用水應近中性，不然可導致各種細胞染色反應異常，以致於識別困難，甚至造成錯誤的。

(3)瑞氏染液發明擴展閱讀

常用的細胞染色方法有：

1、簡單染色法，常用鹼性染料如美藍等進行簡單染色；

2、革蘭氏染色法，主要包括結晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復染四個過程；

3、瑞氏染色法，瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍組成；

4、吉姆薩染色法，吉姆薩染色原理與結果和瑞特染色法基本相同；

5、細胞免疫熒光染色法，免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結合。

染色細胞固定有物理法與化學法，物理法為乾燥和火焰固定，化學法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。

1、偶氮偶聯法：利用人工合成的酶底物，在酶作用下，產生分解產物，再與重氮鹽結合引起偶氮偶聯，使其形成不溶性的偶氮色素，以此證明酶的存在。

2、聯苯胺法：粒細胞和單核細胞中的過氧化物酶作用於過氧化氫，釋放新生態氧，使無色的聯苯胺形成藍色沉澱。

3、普魯士藍法：細胞內、外鐵與酸性亞鐵氰化鉀作用，形成藍色亞鐵氰化鐵沉澱。

⑷ 求瑞氏染色的原理~多謝

瑞氏（ Wright ' s staim ；美藍－伊紅Y）染色：
1 ．瑞氏染料是由鹼性染料美藍（ Methvlem blue ）和酸性染料黃色伊紅（ Eostm Y ）合稱伊紅美藍 染料即瑞氏 （美藍－伊紅Y）染料。
伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子，無色部分為陽離子，其有色部分為酸性，故稱伊紅為酸性染料。美藍通常為氯鹽是鹼性的，美藍的中間產物結晶為三氯化鎂復鹽，其有色部分為陽離子，無色部分為陰離子，恰與伊紅鈉鹽相反。
2 ．用 甲醇作瑞氏 染料溶劑，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶劑，有兩種作用：
（ 1 ）甲醇使瑞氏染料中美藍（ M ）與伊紅（ E ）在溶液中離解，可使細胞成分選擇性吸附其中的有色物質而著色。
甲 醇
ME （瑞氏染料）—— —— → M + + E -
在配製的瑞氏染液中美藍如放置過久即可氧化而含有天青，美藍天青與伊紅化合物能使核染成紫紅色，但不能使胞漿染為藍色，多餘 美藍就可以 使胞漿染成藍色，染色主要是化學作用，是離子彼此結合的反應。
（ 2 ）甲醇具有強大的脫水力，可將細胞固定在一定形態及增加細胞結構的表面積，提高細胞對染料吸收作用，同時由於甲醇吸附染色液中的水，使染色液升溫，加速染色反應。
3. 瑞氏染液配製：
(1) 瑞氏染液配製：
瑞氏染料 830gm 或 1g
甲醇（ AR ） 500ml 或 600ml
先稱乾燥（事先放入溫箱乾燥過夜）瑞氏染料放置乳缽內， 用乳棒輕輕 敲碎染料成粉末，再行研磨至聽不到 研芝麻聲 即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸內顯「一面鏡」光澤，而無染料粉粒沉著，再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入 一 清潔儲存瓶內（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重復數次，直至乳缽內染料及甲醇用完為止，搖勻，密封瓶口，存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存 3 個月以上為佳。
(2) 緩沖液：
1) 緩沖液作用：染色對氫離子濃度是十分敏感的，據觀察 pH 值的改變，可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。 緩沖液須保持 一定的 pH 使染色穩定， PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8 ，偏鹼性染料可與緩沖液中 酸基起 中和作用，偏酸性染料則與緩沖液中的鹼基起中和作用，使 pH 恆定。
2) 緩沖液配製（ pH6.4~6.8 ，弱酸性）：
配方 1 ： 配方 2 ：
1% KH 2 PO 4 30ml M/15 KH 2 PO 4 73.5 ml
1% Na 2 HPO 4 20ml M/15 Na 2 HPO 4 26.5ml
H 2 O( 新鮮 ) 加至 1000ml
置室溫黑暗處，瓶口密封，防止黴菌污染，如有污染則應報廢。

⑸ 瑞氏染色液和吉木薩染色液的區別

吉姆薩染液為天青色素、伊紅、次甲藍的混合物，本染色液最適於血液塗抹標本、血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細胞、脊髓細胞等的染色。染前用蛋白酶等進行處理，然後再用姬姆薩染液染色，在染色體上，可以出現不同濃淡的橫紋樣著色。姬姆薩染液可將細胞核染成紫紅色或藍紫色，胞漿染成粉紅色，在光鏡下呈現出清晰的細胞及染色體圖像。

瑞氏染液由酸性染料伊紅和鹼性染料美藍組成的復合染料，溶於甲醇 ，後解離為帶正電的美藍和帶負電的伊紅離子。

⑹ 瑞氏染色的步驟是什麼

操作步驟：

1.滴加瑞氏吉姆薩A液(約0.5ml-0.8ml)塗片上，並讓染液覆蓋整個標本染色1min；

2. 再將瑞氏吉姆薩B液加於A液上面（滴加量為A液的2-3倍），以嘴或洗耳球吹出微風使液面產生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3-10min。（染血片時間可略短，染骨髓片時間應視細胞量多少而異）

3.水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖去，以防有沉渣沉澱在標本上），乾燥、鏡檢。

注意事項：

1. 染色時間須視何種標本，塗片厚度，有核細胞多少，何種細胞及室溫等而定；通常染血液塗片時滴加B液後染2-4分鍾，染骨髓片則應不少於8分鍾；氣溫較低時，可適當延長染色時間。染色結果如出現嗜酸性粒細胞變鹼，則考慮是否染色時間太長所致。

2.做骨髓塗片時，因為骨髓纖維蛋白含量較高，凝固較快，所以塗片過程要快。骨髓不可用草酸鹽抗凝，否則會使血細胞核變形，核染色質緻密，胞漿空泡形成，出現草酸鹽結晶。

3.染液量需充足，勿使染液蒸發乾燥，以防染料沉著於塗片上。

4.做細胞染色時，當天氣寒冷或濕度較大時，應於37℃溫箱中保溫促干，以免細胞變形縮小或在染色時脫片。

5.染料放置時間越長，染色效果越好。

6. 本試劑應由專業人員使用。

拓展資料

Wrfeht和Giemsa都於1902年報告了各自的新的血液學染色劑，其主要特點是在制備多色性亞甲藍（主要指天青B）方面做了改進，使血細胞和瘧原蟲著色較好，操作簡便。

上述染色法均是含伊紅和亞甲基藍衍生物的復合染料。在臨床檢驗工作中，瑞氏染色法常用於血液、其他體液、分泌物和排泄物塗片中各種細胞的染色，有利於在顯微鏡下觀察細胞形態及對細胞進行分類檢查。

【染色原理】

瑞氏染色分兩相進行，第一相是酸性染料伊紅與細胞中的鹼性物質如血紅蛋白、嗜酸性顆粒等結合；鹼性染料天青B與細胞中的酸性物質如核染色質（chro－matin）、特異中性顆粒、血小板及富含核蛋白的胞質結合。第二相是天青B和伊紅在適宜條件下形成紫色的天青B一伊紅復合物（azure B－eosin complex），這種復合物是形成Romanowsky－Giemsa效應的基礎。

Romanowsky－Giemsa效應包括：①白細胞核染色質染成紫色，瘧原蟲的染色質染成紅色；②中性粒細胞的顆粒及血小板顆粒區染成紫色；③產生本效應必須有兩種染料參與，一種是天青B，另一種是伊紅。

Wittekind（1985）指出，天青B與DNA分子中的磷酸基結合，而伊紅既與DNA分子中的陽離子部位結合，又與天青B結合，與天青B的結合力來源於電子供一受體的電子轉移力，天青B的甲氨基（－NHCHs）與伊紅分子中的叛基（－COOH）間形成氫鍵。因此，天青B是噻嗪類染料中能與伊紅形成復合物的最佳選擇，因為擁有四個甲基側鏈的亞甲藍不能以氫鍵與伊紅結合。

甲醇除作為染料的溶劑，能將瑞氏染料解離成帶正電荷的天青B和帶負電荷伊紅外，因其具有脫水力，還可將細胞固定為一定形態，並使蛋白沉澱為顆粒狀、網狀結構，增加細胞與染料的接觸表面，增強染色效果。

細胞中的各種有機物質（特別是蛋白質）、染料等對環境的州值非常敏感。如環境偏酸，氫離子增多，降低對鹼性染料的親和力；增強伊紅著色，出現異常紅染；相反，則可出現異常藍染。最佳環境應維持在PH值6 4～6、8.因此，必須使用緩沖溶液。

網路_瑞氏染色

瑞氏染色原理及方法_醫學教育網

⑺ 血細胞染色常用的瑞氏染色法的原理主要講一下瑞氏染液。

瑞氏染色法：用瑞氏染色液對細菌進行染色以便進行顯微鏡檢查的染色法

原理
甲醇具強大脫水力，可將細胞固定在一定形態及增加細胞結構表面積，提高細胞對染料吸收作用
同時吸附染色液中的水，使染色液升溫，加速反應

⑻ 求簡述瑞氏染色法的原理，

瑞氏染色是目前最常用而又最簡單的染色方法。瑞氏染料是由鹼性染料美藍和酸性染料伊紅組成的復合染料，用 甲醇作溶劑。
甲醇使瑞氏染料中美藍（ M ）與伊紅（ E ）在溶液中離解，可使細胞成分選擇性吸附其中的有色物質而著色。 在配製的瑞氏染液中美藍如放置過久即可氧化而含有天青，美藍天青與伊紅化合物能使核染成紫紅色，但不能使胞漿染為藍色，多餘 美藍就可以 使胞漿染成藍色，染色主要是化學作用，是離子彼此結合的反應。
伊紅負離子和美藍正離子作用後，變成中性的伊紅化美藍，久置後經氧化而含有天青。此三種染料分別和細胞核及漿中的NH3+和COO-等結合，使細胞核及胞漿著色。

細菌染成藍色，組織細胞胞漿紅色，細胞核藍色。

⑼ 瑞氏染液是什麼東東哦

瑞氏染液
是由酸性染料伊紅和鹼性染料美藍組成的復合染料，溶於甲醇
後解離為帶正電的美藍和帶負電的伊紅離子。

⑽ 瑞氏染色法的詳細介紹

1 ．瑞氏染料是由鹼性染料美藍（ Methvlem blue ）和酸性染料黃色伊紅（ Eostm Y ）合稱伊紅美藍 染料即瑞氏 （美藍－伊紅Y）染料。
伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子，無色部分為陽離子，其有色部分為酸性，故稱伊紅為酸性染料。美藍通常為氯鹽是鹼性的，美藍的中間產物結晶為三氯化鎂復鹽，其有色部分為陽離子，無色部分為陰離子，恰與伊紅鈉鹽相反。
2 ．用 甲醇作瑞氏 染料溶劑，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶劑，有兩種作用：
（ 1 ）甲醇使瑞氏染料中美藍（ M ）與伊紅（ E ）在溶液中離解，可使細胞成分選擇性吸附其中的有色物質而著色。
甲 醇
ME （瑞氏染料）—— —— → M + + E -
在配製的瑞氏染液中美藍如放置過久即可氧化而含有天青，美藍天青與伊紅化合物能使核染成紫紅色，但不能使胞漿染為藍色，多餘 美藍就可以 使胞漿染成藍色，染色主要是化學作用，是離子彼此結合的反應。
（ 2 ）甲醇具有強大的脫水力，可將細胞固定在一定形態及增加細胞結構的表面積，提高細胞對染料吸收作用，同時由於甲醇吸附染色液中的水，使染色液升溫，加速染色反應。
3. 瑞氏染液配製：
(1) 瑞氏染液配製：
瑞氏染料 830gm 或 1g
甲醇（ AR ） 500ml 或 600ml
先稱乾燥（事先放入溫箱乾燥過夜）瑞氏染料放置乳缽內， 用乳棒輕輕 敲碎染料成粉末，再行研磨至聽不到 研芝麻聲 即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸內顯「一面鏡」光澤，而無染料粉粒沉著，再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入 一 清潔儲存瓶內（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重復數次，直至乳缽內染料及甲醇用完為止，搖勻，密封瓶口，存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存 3 個月以上為佳。
(2) 緩沖液：
1) 緩沖液作用：染色對氫離子濃度是十分敏感的，據觀察 pH 值的改變，可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。 緩沖液須保持 一定的 pH 使染色穩定， PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8 ，偏鹼性染料可與緩沖液中 酸基起 中和作用，偏酸性染料則與緩沖液中的鹼基起中和作用，使 pH 恆定。
2) 緩沖液配製（ pH6.4~6.8 ，弱酸性）：
配方 1 ： 配方 2 ：
1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml
1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml
H 2 O( 新鮮 ) 加至 1000ml
置室溫黑暗處，瓶口密封，防止黴菌污染，如有污染則應報廢。
簡易步驟介紹：
1、 取病料塗片、自然乾燥
2、 滴加瑞氏染液染3分鍾,使標本被其中甲醛所固定;
3、 加等量PH6.4的磷酸鹽緩沖液(或等量超純水)輕輕晃動玻片,均勻靜置5分鍾;
4、 水洗、吸干、鏡檢。
5、 細菌染成藍色，組織細胞胞漿紅色，細胞核藍色或紫色。